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特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
产品名称：辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒可见分光光度法
产品规格：50管/24样
检测方法：可见分光光度法
产品货号：BK-01S6322
产品分类：
商品介绍：
| 测定意义 辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。 测定原理 分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本： 取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。 【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取 | ② 细菌/细胞样本： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。 |
实验方法学：
一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
甲醛脱氢酶（FDH）测试盒 甲醛脱氢酶（FDH）测试盒微量法 微量法
甲醛脱氢酶（FDH）测试盒 甲醛脱氢酶（FDH）测试盒紫外分光光度法 紫外分光光度法
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6磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）/葡萄糖6磷酸脱氢酶测试盒 6磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）/葡萄糖6磷酸脱氢酶测试盒微量法 微量法
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6磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGDH）测试盒 6磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGDH）测试盒微量法 微量法
6磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGDH）测试盒 6磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGDH）测试盒紫外分光光度法 紫外分光光度法
肌酸激酶(CK)测试盒 肌酸激酶(CK)测试盒微量法 微量法
phospho-GEF H1 (Ser886) 磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体
phospho-Afadin (Ser1721) 磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体
ARPC1A 肌动蛋白相关蛋白2/3亚型1A抗体
ANKRD32 锚蛋白重复结构域蛋白32抗体
ATXN7L3B 共济失调7样蛋白3B抗体
POP1 感染性蛋白白1抗体
ASB5 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体
ABP1 植物生长激素ABP1抗体
phospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化复制因子2抗体
ADRA1B alpha 1肾上腺素能受体B抗体
Bcl-2 alpha Bcl2 alpha蛋白抗体
BAT5 白细胞抗原B相关转录蛋白5抗体
BTBD1 BTB/POZ结构域蛋白1（丙型肝炎病毒的NS5A反转录蛋白8）抗体
BCL7B BCL7B蛋白抗体
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒可见分光光度法BNC2 碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体
BCL7C B细胞白血病/淋巴瘤蛋白7抗体
BSCL2 先天性脂肪代谢障碍蛋白2抗体（常染色体显性遗传痉挛性截瘫17）
BTG1 B细胞迁移基因1抗体
BEAN1 脊髓小脑共济失调蛋白BEAN1抗体
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
