土壤碱性磷酸酶(SAKP/ALP)测试盒微量法
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土壤碱性磷酸酶(SAKP/ALP)测试盒微量法

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2023-12-25 09:45:27
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上海帛科生物技术有限公司

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产品简介

土壤碱性磷酸酶(SAKP/ALP)测试盒微量法公司正在出售的产品:SCHAEDLER 琼脂进口、国产SCHAEDLER AGAR用于厌氧菌的分离培养(Acumedia 方法)250WILKINS-CHALGREN琼脂进口、国产WILKINS-CHALGREN AGAR用于厌氧菌的分离培养(Acumedia 方法)250MCP琼脂进口、国产MCP Agar用于产气荚膜梭菌的计数和培养(Acumedi

详细介绍

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

土壤碱性磷酸酶(SAKP/ALP)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6841

商品介绍:

测定意义:

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。

测定原理:

碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成和,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、无水乙醇和甲苯。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pAd/CMV/V5-DEST pAd/CMV/V5-DEST 低温运输,-20℃保存

支原体琼脂 Mycoplasma Agar Medium 250g

1瓶 GT1-1细胞株 GT1-1 低温运输和保存

225ml胰酪胨大肉汤均质袋 Trypticase Soy Polymyxin Broth 10个/包

200 U 限制性内切NcoI Restriction Endonuclease -20℃保存

EC肉汤颗粒 E.Coli Broth 300ml/袋*10

1 管 Stbl2大肠杆菌 Stbl2 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pQE-80 pQE-80 低温运输,-20℃保存

HBI志贺氏菌生化鉴定条(GB)  5条/盒

2 ug pcDNA3 CFP pcDNA3 CFP 低温运输,-20℃保存

DTM DTM Medium 250g

土壤碱性磷酸酶(SAKP/ALP)测试盒微量法Tumstatin/COL4A3  瘤抑素抗体 规格: 0.2ml

RNF186  环指蛋白186抗体 规格: 0.2ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/RBITC  罗丹明标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1ml

CD68  CD68抗体 规格: 0.1ml

HEBP1/p22HBP  红素结合蛋白1抗体 规格: 0.2ml

KCC2/SLC12A5  神经细胞钾氯离子转运蛋白抗体 规格: 0.1ml

PSMC1/Proteasome 19S S4   26S蛋白调节亚型抗体 规格: 0.1ml

EBNA 3A  EB毒核抗原-3A抗体 规格: 0.2ml

EGF  抗表皮生因子抗体 0.1ml

RAIDD  CASP2凋亡相关蛋白抗体 规格: 0.1ml

DHRS3  短链脱还原3抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Cofilin/CFL1 (Tyr139)  磷酸化丝切蛋白抗体 规格: 0.1ml

 


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