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商品介绍:
测定意义: 无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等,此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。 测定原理: 钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量。 自备仪器和用品: 离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。 |
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
组织无机磷含量测试盒可见分光光度法 | 50管/48样 | 可见分光光度法 | BK-01S6803 |
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
25mg 萘 AS-TR 盐 Naphthol AS-TR Phosphate Disodium Salt -20℃保存
50T 流行性脑膜炎双球菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
5mL 间充质干细胞脂防细胞分化生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL AMP Buffer,0.5M,pH10.0 AMP Buffer,0.5M,pH10.0 常温保存
50uL 电泳级SYBR Green I SYBR GreenⅠ, EG -20℃保存
2 ug pGEM3 pGEM3 低温运输,-20℃保存
素B用 250g
1瓶 DCS(实体瘤)细胞株 DCS(实体瘤) 低温运输和保存
卵黄素琼脂平板(9cm) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 10个/包
2500U 9°N DNA 连接(9°N DNA Ligase) 9°N DNA Ligase -20℃保存
100mL POPSO Buffer,0.2M,pH7.0 POPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存
组织无机磷含量测试盒可见分光光度法PCB 丙酮酸羧化抗体 规格: 0.2ml
SKP1 S期激相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
P53(wt-p53) (D2F7) 瘤抑制基因野生型P53单抗 规格: 0.1ml
IKK alpha/IkappaB kinase KB抑制蛋白激α抗体 规格: 0.1ml
NDRG1/Cap43 分化相关基因NDRG1抗体 规格: 0.1ml
EPHX2 胞浆环氧化物水解抗体 规格: 0.2ml
2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体 0.2ml
IL-18R Beta/IL1R7/CD218b 白细胞介素-18受体β链抗体 规格: 0.2ml
Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烃受体抗体 规格: 0.2ml
CD24 CD24抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Gold 胶体金标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.5ml
PCDHGA8 原钙粘蛋白γA8抗体 规格: 0.2ml