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上海市所在地
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | Hoechst33342/PI双染试剂盒 |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 100T |
货号 | BK-S64160 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨细胞病毒 HCMV gB 人细胞裂解液 (阳性对照) 雷尼替丁杂质B质量规格:美国进口Ranitidine Impurity B
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B6雷尼替丁质量规格:美国进口Ranitidine
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基-5,6-二氯-3(4H)-喹唑啉醋酸(阿那格雷杂质B)质量规格:美国进口2-Amino-5,6-dichloro-3(4H)-quinazoline Acetic Acid(Anagrelide Impurity B)
C26瘤 结肠癌3-羟基阿那格雷质量规格:美国进口3-Hydroxy Anagrelide
THLE-3人肝永生化细胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM培养基(目录号CC3170)雷洛昔芬4'-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Raloxifene 4'-Glucuronide
BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒构建稳定株)人原位胰腺腺癌细胞 BxPc-3-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin1酸二酯酶 (比活度:>20 U/mg,BC)质量规格:比活度:>20 U/mg,BCPhosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom
IL2 Protein Human 重组人 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白化丙啶(>95% (HPLC),BC)质量规格:>95% (HPLC),BCPropidium iodide
人食道上皮细胞(HEEC)(5×105 ) RN-c, 大鼠皮质神经元 Rattus血管紧张素III质量规格:>97%,BRAngiotensin III,human
大额牛皮肤细胞;BFR-S3蜂毒明肽; 蜂针液明肽质量规格:BR,>97%Apamin
EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人细胞裂解液 (阳性对照) 枸橼酸氯米芬,克罗米芬质量规格:>98%,BRClomiphene
MIF Others Mouse 小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) 铁蛋白(马脾),英文名或英文缩写:HSF,级别:BR,10-20u/mg,规格:100u
16HBE 人支气管上皮细胞1.10-癸二醇 1,10-Dqccnqdiol 11-47-0
CL-0263BGC-803(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2D-扁桃醋 Mcndqlic ccid 611-71-
RDFs, 大鼠成纤维细胞MES,FREEACID,MONOHYDRATEMES缓冲液,一水超级
Asp2人胚胎肾细胞转化细胞;FC33 人肾小球内皮细胞*培养基 100mL60668-01-1L-脯酸苄酯盐酸盐L-Proline benzyl ester xy7nochloride
Hoechst33342/PI双染试剂盒BRL-3A细胞,大鼠正常肝细胞 SK-N-SH(神经母细胞瘤细胞) 人髓母细胞瘤细胞;Daoy栎樱酸(标准品)Roburic acid质量规格:HPLC≥98%,标准品
CSF2 Protein Rat 重组大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)连翘苷(标准品)Phillyrin质量规格:HPLC≥98%,标准品
SW626(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 连翘酯苷A(标准品)Forsythoside A质量规格:HPLC≥98%,标准品
人食道平滑肌细胞HESMC连翘酯苷B(标准品)Forsythoside B质量规格:HPLC≥98%,标准品
STXBP3 Others Human 人 STXBP3 / UNC-18C 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 莲心碱(标准品)Liensinine质量规格:HPLC≥98%,标准品
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