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实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:乳酸含量(LA)测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6588
产品分类:三羧酸循环系列
商品介绍:
测定意义: 乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。 测定原理 乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
大肠杆菌噬菌体MS2半固体培养基 Coliphage MS2 Medium(Semisolid) 250g
50g 1,3-二[三(羟甲基)甲氨基]丙烷 Bis-Tris Propane 室温保存
500mL Tris-HEPES Native Running Buffer,10X Tris-HEPES Native Running Buffer,10X 常温保存
10mL His标签蛋白专用蛋白抑制剂 Protease Inhibitor for His-tagged Protein -20℃保存
2 ug pTWIN 2 pTWIN 2 低温运输,-20℃保存
50次 柱式凝固血液DNAout Column Blood Clot DNAOUT 常温
2 ug pEGFP-1 pEGFP-1 低温运输,-20℃保存
1g 干粉 Tetracycline HCl Powder 4℃干燥避光保存
1瓶 15P-1细胞株 15P-1 低温运输和保存
50T 志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
10mg DAPI干粉 DAPI Powder -20℃干燥避光保存
乳酸含量(LA)测试盒可见分光光度法NIRF/RNF107 环指蛋白107抗体 规格: 0.2ml
HIP1R/HIP12/HIP3 亨丁顿舞蹈症相互作用蛋白12抗体 规格: 0.2ml
B3GALNT1 β1,3半糖转移3抗体 规格: 0.2ml
Cbx8 染色质结合蛋白Cbx8抗体 规格: 0.2ml
CGI62/C8orf70 8号染色体开放阅读框70抗体 规格: 0.2ml
MKRN1/RNF61 环指蛋白61抗体 规格: 0.2ml
PAFAH1B2 小板衍化生因子β抗体 规格: 0.2ml
COMMD7 铜代谢结构域蛋白7抗体 规格: 0.2ml
ADFP 脂肪组织分化相关蛋白抗体 0.1ml
Beta-lactoglobulin β-球蛋白抗体 规格: 1mlPTOV1 前列瘤高表达蛋白1抗体 规格: 0.2ml
SLC12A3/NCCT 钠氯离子转运蛋白抗体 规格: 0.2mlAUTS2 孤独症易基因2蛋白抗体(自闭症相关蛋白1) 规格: 0.2ml
CCDC61 卷曲螺旋结构域蛋白61抗体 规格: 0.2mlphospho-AQP2(Ser264/261) 磷酸化水通道蛋白2抗体 0.1ml