丙酮酸(PA)含量测试盒微量法
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丙酮酸(PA)含量测试盒微量法

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2023-12-27 13:53:33
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上海帛科生物技术有限公司

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产品简介

丙酮酸(PA)含量测试盒微量法公司正在出售的产品:Fraser培养基 英文名称:Fraser Medium 产品规格:250g PALCAM添加剂1 英文名称: 产品规格:1ml/支*5 LPM琼脂 英文名称:LPM Agar 产品规格:250g 改良缓冲蛋白胨水(MBP) 英文名称:Modified Buffered Peptone Water 产品规格:250g

详细介绍

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

丙酮酸(PA)含量测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6589

商品介绍:

测定意义:

丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。

测定原理:

丙酮酸与2,肼作用,生成丙酮酸-2,腙,在碱性溶液中呈樱红色。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

25mL IEF Sample Buffer,4X,pH 3-7  IEF Sample Buffer,4X,pH 3-7  常温保存

1mL Real-Time PCR稀释液 Diluent for Real-Time PCR  -20℃保存

2 ug pLV-CMV-EGFP pLV-CMV-EGFP 低温运输,-20℃保存

布氏杆菌种子培养基  250g

1瓶 NCI-H446/VP细胞株 NCI-H446/VP 低温运输和保存

50次 DNA电泳分子量标准(100-600bp) DNAMETER 4℃保存

1g  Bacitracin 室温避光保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.2   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.2   常温保存

1mg 重组蛋白L Recombinant Protein L -20℃保存

2 ug pUB6/V5 His lacZ pUB6/V5 His lacZ 低温运输,-20℃保存

50次 柱式昆虫DNAout Column Insect DNAOUT 常温

丙酮酸(PA)含量测试盒微量法Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023)  磷酸化蛋白质酪激JAK-1抗体 规格: 0.1mlRNF157  环指蛋白157抗体 规格: 0.2ml

KNL2/C14orf106  14号染色体开放阅读框106抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-rat IgM/Cy7  Cy7标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1ml

phospho-Alpha synuclein (Tyr136)  磷酸化核突触蛋白α抗体 规格: 0.1mlPTPN11  蛋白酪磷酸2抗体 规格: 0.1ml

NGX6  鼻咽细胞相关基因6抗体 规格: 0.1mlCKAP2  细胞骨架相关蛋白2/瘤和微管相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

Acetyl-Histone H1b(K53)  乙酰化组蛋白H1b抗体 规格: 0.2mlRASGAP  RAS的GTP激活蛋白抗体 规格: 0.2ml

CD158a/KIR2DL1  NK细胞抑制性受体2DL1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy3  Cy3标记的兔抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlAlpha s1 Casein  α-s1酪蛋白抗体 规格: 0.2ml

CNTN4/AXCAM  轴突相关粘附分子抗体 规格: 0.2mlSalmonella enteritidis H  伤鞭毛抗原H抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgM/Cy5  Cy5标记的兔抗马IgM 规格: 0.1mlMRGX1/MRGPRC/SNSR  G蛋白偶联受体MRGX1抗体 规格: 0.1ml

X protein/HB-X (middle)  抗乙肝毒X蛋白抗体 规格: 0.2mlTRAILR1/DR4/APO2  死亡受体4抗体 规格: 0.1ml

Urocortin  尿皮质素抗体 规格: 0.2mlRNF43  环指蛋白43抗体 规格: 0.2ml

MeCP2  甲基化CpG结合蛋白2抗体 规格: 0.1mlPectinesterase  果胶抗体 1ml

 


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