天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法
天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法
天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法

天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2023-12-27 19:11:45
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上海帛科生物技术有限公司

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产品简介

天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:WLD培养基 英文名称:WLD Medium 产品规格:250g 不*琼脂培养基 英文名称:Incomplete Agar Medium 产品规格:250g ISP培养基2 英文名称:ISP Medium 2 产品规格:250g 氯溶液(20mg) 英文名称: 产品规格:1ml*5

详细介绍

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

BK-01S6513

商品介绍:

测定意义:

天冬酰胺合成酶是广泛存在于生物体内的一类氨基转移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬转移。当植物处于氨毒时天冬酞胺的形成是一种解毒反应。测定原理:

AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。

需自备仪器和用品:

台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

30次 一站式蛋白质非变性PAGE套装(高pH 缓冲液套) One-Stop Protein Native PAGE Pack 常温保存(上样液需要-20℃保存)

无菌均质袋(不带压条) Sterile Homogeneous Bag 100个/包

200次 一管式病毒DNAout One-Tube Viral DNAOUT 常温

2 ug pET-24b(+) pET-24b(+) 低温运输,-20℃保存

PALCAM肉汤 PALCAM Broth 250g

1瓶 4179细胞株 4179 低温运输和保存

1000只 专用离心管 (配研磨杵用)   常温

24 T 测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH6.0   MES Buffer,1.0M,pH6.0   常温保存

100次 植物种属鉴定PCR Mix 2(细胞核 ITS2) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

50T 人瘤病毒高危型PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

天冬酰胺合成酶(AS)测试盒可见分光光度法FOS B  FosB蛋白抗体 规格: 0.1ml

phospho-HSP70(Tyr525)   磷酸化热休克蛋白70抗体 规格: 0.1ml

HIV2 gp36  人类免疫缺陷毒2型抗体(艾滋毒) 规格: 0.1ml

Claudin 5  紧密连接蛋白5抗体 规格: 0.1ml

FAM50C  FAM50C蛋白抗体 规格: 0.2ml

PCDHGB5  原钙粘蛋白γB5抗体 规格: 0.2ml

ABP1  植物生激素ABP1抗体 1ml

USF-1  等上游刺激因子1抗体 规格: 0.1ml

RanBP1  RAN结合蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Mad2L2  有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白2抗体 规格: 0.2ml

phospho-YWHAE(Thr232)  磷酸化14-3-3E蛋白抗体 规格: 0.1ml

Phospho-Gab1 (Tyr659)  磷酸化接蛋白Gab 1抗体 规格: 0.1ml

 


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