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注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:脂肪酸合成酶(FAS)测试盒紫外分光光度法
产品规格:10管/9样
检测方法:紫外分光光度法
产品货号:BK-01S6366
产品分类:辅酶Ⅱ系列
商品介绍:
测定意义: 细胞内脂质的积累是脂质合成与分解失衡的结果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,会导致细胞内脂质积累。FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰和丙二酰而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。 测定原理 以NADPH为还原力,FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成长链脂肪酸;通过测定NADPH的减少量,即可推算出FAS活性。 实验中所需仪器和用品 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
液体硫乙醇酸盐培养基颗粒 Thioglycollate Medium 300ml/袋*10
48 T 碱性测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH6.0 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH6.0 常温保存
20次 天净沙通用型MLPA试剂盒 Single Cell RNA Amplification Kit -20℃保存
2 ug pLX304 pLX304 低温运输,-20℃保存
肉汤培养基(测磷细菌菌数) 250g
1瓶 PIEC细胞株 PIEC 低温运输和保存
LIM培养基 LIM Medium 250g
1瓶 MDBK (NBL-1)细胞株 MDBK (NBL-1) 低温运输和保存
50T 巴贝斯虫PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
25g 咪唑 Imidazole 常温保存
脂肪酸合成酶(FAS)测试盒紫外分光光度法Acetyl-Histone H3(K23) 乙酰化组蛋白H3抗体 规格: 0.2ml
MAL T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 规格: 0.2ml
AGPAT4 溶磷脂酸酰基转移D抗体 0.2ml
SASS6 纺锤体组装异常蛋白6抗体 规格: 0.2ml
CMG1 毛细管形态发生蛋白1抗体 规格: 0.2ml
GABBR2/GB2 G氨基丁酸B型受体2抗体 规格: 0.1ml
IL-1RA 白介素-1受体拮抗剂抗体 规格: 0.2ml
phospho-STXBP1(Ser515) 磷酸化神经突触前膜胞内蛋白抗体 规格: 0.1ml
A2AR/Adenosine A2a receptor 苷A2A受体抗体 0.1ml
AKR1B10 醛糖还原相关蛋白质抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Bio 标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
EFR3A EFR3A蛋白抗体 规格: 0.2ml