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特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
产品名称：蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法
产品规格：50管/48样
检测方法：紫外分光光度法
产品货号：BK-01S6368
产品分类：辅酶Ⅱ系列
商品介绍：
测定意义: SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷键，催化葡萄糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相应的葡萄糖基低聚糖。此外，SP还能催化合成熊果苷，具有的美白效果，在化妆品工业中具有重要应用。 测定原理： SP能够以磷酸为受体，催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH，导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率，即可计算SP活性。 自备实验用品及仪器： 天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、1mL石英比色皿和蒸馏水。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本： 取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。 【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10 4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。 |
实验方法学：
一、肝素的配制：
市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集：
全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
1瓶 PA317细胞株 PA317 低温运输和保存
兔血浆 Rabbit plasma 0.5ml*10
50g 酪蛋白 Casein From Bovine Milk 室温干燥保存
500mL Wash Buffer Wash Buffer 常温保存
100U 二酯Ⅰ Phosphodiesterase I -20℃保存
2 ug pUSE （Amp） pUSE （Amp） 低温运输，-20℃保存
50次 柱式海洋动物DNAout Column Marine Animal DNAOUT 常温
2 ug p3×FLAG-CMV-8 p3×FLAG-CMV-8 低温运输，-20℃保存
乳酸杆菌选择性培养基 LBS Agar 250g
25g 1：250 Trypsin 1:250 Porcine Pancreas 4℃保存
50T 猪脑心肌炎病毒PCR检测试剂盒 低温运输，-20℃保存
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法Integrin beta 6 整合素β6抗体（Integrin β6） 0.2mlAdenylate Kinase 1/AK1 苷酸激-1抗体 规格: 0.2ml
LAMP-3/DC-LAMP/CD208 溶体相关膜蛋白3抗体 规格: 0.1mlPhospho-HER3(Tyr1328) 磷酸化HER3受体抗体 规格: 0.1ml
Exendin 4 GLP1类似蛋白Exendin4抗体 规格: 0.1mlphospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 规格: 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗牛IgG 规格: 0.1mlCR1/CD35 Ⅰ型补体受体抗体（C3b/C4b受体抗体） 规格: 0.1ml
KLHL36/C16orf44 Kelch样蛋白36抗体 规格: 0.2mlCASC5 瘤易性候选基因5抗体 规格: 0.2ml
GABRA1 G1氨基丁酸A型受体α1抗体 规格: 0.1mlTIMP-2 金属蛋白组织抑制因子-2抗体 规格: 0.1ml
phospho-APE(Ser1417) 磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体 规格: 0.1mlDC-SIGN/CD209 细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1mlPLGLB2 纤溶相关蛋白B2抗体 规格: 0.2ml
Cdc7 细胞分裂周期蛋白7抗体 规格: 0.1mlAKT3 蛋白激B3 规格: 0.1ml
HSPBAP1 热休克蛋白27相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlGRM2/GLUR2 促代谢型谷受体2抗体 规格: 0.1ml
TTC23 宫颈原基因8抗体 规格: 0.2mlCytokeratin 13/CK-HMW 高分子量细胞角蛋白抗体 规格: 0.1ml
RIT1 RIT1蛋白抗体 规格: 0.2mlTPSB2 肥大细胞类胰蛋白β2 规格: 0.1ml
注意事项：
1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
