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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
视网膜色素上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)茄尼醇（标准品）质量规格：HPLC≥97%，标准品Solanesol

GRK6 Others Human 人 GRK6 / GPRK6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside

tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-4B3秦皮苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Fraxin

SH-SY5Y细胞，神经母细胞瘤细胞 人胆囊癌细胞,GBC-SD细胞 CL-0048Ca Ski(人上皮细胞)5×106cells/瓶×2秦皮甲素（标准品）质量规格：≥98%，标准品Esculin

人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0氨基三乙酸（标准品）质量规格：供HPLC法杂质检查用Nitrilotriacetic acid
CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人细胞裂解液 (阳性对照) 十烷基基溴化500毫克2～8℃

LS174T 人结肠癌细胞5-溴-2-录嘧啶 5-Bromo-2-chloropyrimidinq 3779-36-2

MDA-MB-231人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS溶葡球菌酶100克

TDGF1 Protein Rat 重组大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 标签)3-录本酸25克

人羊膜细胞;WISH SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 Human(沙氏葡糖琼脂)
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白石英砂Quartz sand质量规格：BR

MuM-2B(人眼脉络色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 脐静脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)3-氨基-1,2,4-三唑3-AT质量规格：>96%,分子生物学级

小耳猪肾细胞;SEPfk1酸钠十二水 phosphate, tribasic, dodecahydrate质量规格：>98%,AR

ACVR1 Others Rat 大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 无水1酸氢二钠(分子生物学级) phosphate, dibasic, anhydrous质量规格：>99%,分子生物学级

人小气道平滑肌细胞*培养基 100mL菲啰嗪,菲洛嗪Ferrozine质量规格：>97%,BR
总抗氧化能力T-AOC检测试剂盒LS174T 人结肠癌细胞氟喹酮(标准品)质量规格：>98%,标准品Afloqualone

MDA-MB-231人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS磺胺醋酰钠 SA-NA质量规格：>99%,BRSufacetamide

TDGF1 Protein Rat 重组大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 标签)司班80;司盘80质量规格：BRSpan* 80

人羊膜细胞;WISH SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 Human聚乙二醇1000质量规格：分子量1000PEG 1000

T-112B胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL胰蛋白胨(BD)质量规格：BD 211705Tryptone
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。