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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-Calponin 3/Acidic Calponin
中文名称 Calponin 3/Acidic Calponin抗体
别 名 Acidic calponin 3; acidic isoform; Calponin 3 acidic; Calponin3; Calponin acidic; Calponin acidic isoform; Calponin; Calponin-3; Calponin3; CNN 3; Cnn3; CNN3_HUMAN; dJ639P13.2.2; OTTHUMP00000012470; OTTHUMP00000012471.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 心血管 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Calponin 3/Acidic Calponin
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
鸡破骨相关受体(OSCAR)酶联免疫吸附测定试剂盒2,4-二氟-3-氧苯闪光须霉拉丁属名: Aspergillus oryzae
鸡甘肽/甘素受体1(GALR1)酶联免疫吸附测定试剂盒 2,4-二氟-3-氧苯米曲霉拉丁属名: Corynebacterium glutamicum
鸡β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)酶联免疫吸附测定试剂盒3-溴呋喃谷氨棒杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡凝血酶/抗凝血酶复合物(TAT)酶联免疫吸附测定试剂盒3-溴呋喃香草兰根疾拉丁属名: Sphingomonas gei sp. Nov
鸡神经生长因子 (NGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 2,2-二氟-1,3-二-咪唑烷鞘氨单胞菌属注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡平足蛋白(PDPN)酶联免疫吸附测定试剂盒2-乙酰吡葡萄座腔菌用途: 杀鳞翅目昆虫幼虫
鸡肌腱蛋白C(TNC)酶联免疫吸附测定试剂盒2-乙酰吡苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种拉丁属名: Marivirga tractuosa
鸡周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶联免疫吸附测定试剂盒 2-乙酰吡Marivirga tractuosa用途: 害虫生物防治
鸡核因子κB (NFκB)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-L-2-溴苯氨蜡状芽孢杆菌拉丁属名: Novosphingobium resinovorum
鸡半乳凝集素3(GAL3)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-D-炔甘氨食树脂新鞘氨菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡红膜蛋白(EMP)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-氟-2-苄光孢黄丛枝珊瑚菌拉丁属名: Myrothecium jollymannii
鸡核糖核酶III(RNASEN)酶联免疫吸附测定试剂盒 氘代乙约利曼漆斑菌拉丁属名: Staphylococcus aureus subsp. aureus
鸡胰淀素(IAPP)酶联免疫吸附测定试剂盒 氘代乙金黄色葡萄球菌金黄亚种拉丁属名: Pseudarthrobacter siccitolerans
鸡REST协阻抑因子3(RCOR3)酶联免疫吸附测定试剂盒(R)-(+)-2,2′,6,6′-四氧-4,4′-双(二苯膦)-3,3′-联吡啶Pseudarthrobacter拉丁属名: Bacillus subtilis
鸡微球粒蛋白1(MCRS1)酶联免疫吸附测定试剂盒5,10,15,20-四(4-氧苯)卟啉枯草芽孢杆菌拉丁属名: Paracoccus denitrificans
鸡早期生长应答蛋白4(EGR4)酶联免疫吸附测定试剂盒5,10,15,20-四(4-氧苯)卟啉副球菌属拉丁属名: Escherichia coli
Calponin 3/Acidic Calponin抗体鸡生长分化因子15(GDF15)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC 荧光素标记磷酸化角蛋白17抗体IgG
鸡精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CK18/FITC 荧光素标记角蛋白18抗体IgG
鸡TATA框结合蛋白相关因子2(TAF2)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CK18(C-term) /FITC 荧光素标记角蛋白18抗体(C端)IgG
鸡神经特异性烯化酶(NSE)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CK18/FITC 荧光素标记角蛋白18抗体IgG
鸡趋化因子CC受体样蛋白1(CCRL1)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CK19/FITC 荧光素标记角蛋白19抗体IgG
鸡Ⅲ型胶原(COL3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CK19/Gold 胶体金离子标记角蛋白19抗体IgG
鸡生长激素诱导跨膜蛋白(GHITM)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CK19/FITC 荧光素标记角蛋白19抗体IgG
鸡颗粒酶K(GZMK)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CK19/RBITC 红色荧光素罗丹明标记角蛋白19抗体IgG