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试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服务:
公司产品仅用于科研我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
TAF肿瘤血管生长因子ELISA试剂盒 | TAF ELISA Kit | 48T/96T | LZ-E028562 |
样品准备:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
抗钙蛋白抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA it马兜铃C乙戊酯 CP,98.5% 丁位癸内酯 98%
抗钙蛋白抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA it马兜铃茴香 98%邻氨苯酯 98%
卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒马来乙缩 CP,97%位癸内酯 98%
卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒马钱乙缩 Standard for GC,>99%(GC)邻氨苯酯 ≥98%, FCC, Kosher
抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)试剂盒 马钱乙缩 98%正癸 98%
抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)试剂盒 买麻藤乙缩 ≥98%, FG1,4-二氧苯 99%
系统性红斑狼疮(SLE)试剂盒 麦冬元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖茴香烯 99%一缩二 99%
系统性红斑狼疮(SLE)试剂盒 麦冬黄烷A乙溶液 35 wt. % in H2O一缩二 98%
抗抗体(GM1)试剂盒麦冬内酯A位戊桂 97%癸 97%
抗抗体(GM1)试剂盒麦冬皂A杨梅 98%2,5-二吡 98%
抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)试剂盒 麦冬皂B乙戊酯 ≥99%丁位十二内酯 98%
抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)试剂盒 麦冬皂C2,3-丁二 98%乙癸酯 98%
抗中性粒颗粒抗体(ANGA)试剂盒麦冬皂D丁丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)乙二苄原酯 99%
抗中性粒颗粒抗体(ANGA)试剂盒麦冬皂D'丁丁酯 >99.0%(GC)乙二苄原酯 98%, FCC, Kosher
抗中性粒抗体(ANA)试剂盒 麦角甾苯苄酯 CP,98.0%2,6-二-2-庚 99%
抗中性粒抗体(ANA)试剂盒 麦芽糖苯苄酯 >99.0%(GC)癸乙酯 99%
TAF肿瘤血管生长因子ELISA试剂盒本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA),释放出游离的硝基pNA,后者呈黄色在405nm具有大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定,吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD,与ICE有51%的同源性,在过量表达时可诱导凋亡发生。
所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长:大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定。