载体蛋白偶联和MAPs

载体蛋白偶联-多肽偶联技术

肽-载体蛋白衔接多用于制备抗毒素类抗体，单独的单个通常通常小小的不足以激起充分的免疫反应，而带有很多抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性T细胞，进一步诱导B细胞免疫反应。

合生生物偶联蛋白主要如下几种：

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin），即血蓝蛋白，由于KLH比BSA有更高的免疫原性，因此是常被替换的载体蛋白。

BSA（牛血清白蛋白），即牛血清白蛋白，属于十分稳定的和可溶的白蛋白。BSA的不利之处在于在很多实验中，它被当作封闭剂使用，如果多肽-BSA偶联物的抗血清用于这样的检测分析中，通常会出现假阳性，因为这些血清含有抗BSA的抗体。

OVA（Ovalbumin），即鸡卵白蛋白，它可作为第*二载体蛋白去验证抗体是否仅针对靶向而并非载体蛋白（如BSA）。

所有可携带的基基反应的功能基团经修饰都可被替换为发生共轭反应。合生生物偶联反应，其中十分常见的有以下几种：

碘乙酰胺（碘乙酰胺）

马来掺杂（马来酰亚胺）

烷基卤（卤代烷）

MAPs分支肽-多肽偶联技术

多种抗原肽（MAP）是人工分支的肽，其中Lys残基用作支架核心，以支持形成具有不同或相同肽序列的≤8个分支。

多种抗原肽已被用于生产用于免疫学研究的抗体。MAP具有高的肽抗原与核心分子摩尔比，并且不需要载体蛋白来

引发抗体应答。

自然界中没有已知的分支蛋白，合生生物通过化学连接策略解决了这个问题，该策略可以提高产率生产所需的肽树状大

分子。然后，分支结构可以形成分子量增加的蛋白质以引发免疫原性应答。

MAP与带有载体蛋白的肽

在支链赖氨酸上合成四或八个拷贝的肽；因此，MAP肽的作用类似于大蛋白。

MAP肽直接与佐剂一起注射以产生抗体。不需要载体蛋白。

MAP技术有利于N末端或内部肽，因为该肽通过C末端连接。相反，KLH-结合倾向于C-末端肽。但是，KLH载体可能会

引起空间位阻。

由于MAP肽的结构，其滴度可能比KLH缀合的肽略高。MAP设计大大程度地提高了抗原浓度，因为合成的肽抗原占所得

产品总重量的95％。

使用MAP，每次都可以使用已知量的肽进行免疫，从而可以更好地控制实验条件。