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产品名称:消化液Trypsin-EDTA0.25%
产品货号:C0160-711
产品规格:500ML
运输温度:-20摄氏度
效 期:12个月
使用Trypsin-EDTA0.25%消化液的基本步骤如下:
1.准备阶段:
- 吸去细胞培养瓶中的旧培养基。
- 使用PBS(磷酸盐缓冲液)、Hank's液或其他无血清的缓冲液清洗细胞一次,以去除残留的血清和其他可能影响Trypsin-EDTA活性的物质。
2. 消化阶段:
- 加入适量的Trypsin-EDTA0.25%消化液,确保液体覆盖所有细胞。
- 室温下孵育,时间根据细胞类型而定,一般从几十秒到几分钟不等。消化时间过长可能会损伤细胞。
3. 终止消化:
- 当细胞开始从表面松动时,立即吸去Trypsin-EDTA0.25%消化液。
- 加入含有血清的新鲜培养基,因为血清中的蛋白质能中和Trypsin-EDTA0.25%的活性,终止消化过程。
4. 离心与重悬:
- 将细胞混合物转移到离心管中,进行低速离心(约1000~2000 g)1分钟,收集细胞沉淀。
- 去除上清液,使用新鲜的wan全培养基重新悬浮细胞,然后可将细胞分种到新的培养瓶或进行进一步的实验操作。
注意事项:
- 不同类型的细胞对Trypsin-EDTA0.25%的敏感度不同,消化时间需要根据经验或文献指导调整。
- 消化过程中应密切观察细胞状态,避免过度消化导致细胞损伤。
- 一些细胞类型可能需要不含EDTA的Trypsin消化液,尤其是用于原代细胞分离时,因为EDTA可能会影响某些细胞的功能或存活率。
- 在处理Trypsin-EDTA0.25%消化液时,要遵循实验室安全规范,因为Trypsin-EDTA0.25%和EDTA都是潜在的刺激性化学物质。
这些步骤和注意事项适用于大多数细胞系,但在具体操作时,应参考特定产品的说明书以及细胞系的特性来进行适当的调整。