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产品名称:Good RNAiMAX Transfection Reagent 脂质体RNAiMAX 转染试剂
产品货号:C0170-ZX01
产品规格:0.75ML
运输温度:2-8℃
效 期:12个月
注意事项:禁止冷冻
产品性能:
Good RNAiMAX转染试剂适用于广泛的细胞类型,包括但不限于MDA-MB-435、HeLa、HT1080、A549、HepG2、MCF7、SK-N-SH等细胞系,以及干细胞和原代细胞。转染后无需去除转染复合物或更换/添加培养基,简化了实验操作流程。
操作流程:
转染过程大多很简单:混合核酸和转染试剂,等几分钟,加到细胞中,几天后分析。
具体步骤包括:
用Opti-MEM分别稀释RNA分子和Good RNAiMAX,将两者混合,室温下孵育10-20分钟。
加入培养细胞中,在37°C孵育24-48小时。
反向转染是更快的操作方式,适合高通量转染。反向转染时,首先在孔内制备复合物,然后再将细胞和培养基添加到孔板中。
使用RNAiMAX进行转染的优点包括:
1. 高效性:能够有效转染多种难转染的细胞类型。
2. 低毒性:对细胞的毒性相对较低,适合长期实验和敏感细胞系的转染。
3. 易操作:转染过程简单,易于控制和重复。
在使用Good RNAiMAX进行转染时,一般需要按照以下步骤操作:
1. 准备细胞:确保细胞处于良好的生长状态,通常在转染前24小时接种至适当的密度。
2. 制备转染复合物:将Good RNAiMAX与siRNA或miRNA在无血清培养基中混合,形成复合物。
3. 转染:将制备好的复合物加入到细胞培养基中,轻轻摇晃培养皿以确保均匀分布。
4. 培养:根据实验设计,在适宜条件下培养细胞一定时间,以便观察转染效果。
5. 检测:使用适当的方法检测基因沉默的效果,如实时定量PCR、Western blot等。
转染用量:
96孔板:siRNA最终用量为1 pmol,Good RNAiMAX转染试剂最终用量为0.3 μL。
24孔板:siRNA最终用量为5 pmol,Good RNAiMAX转染试剂最终用量为1.5 μL。
6孔板:siRNA最终用量为25 pmol,Good RNAiMAX转染试剂最终用量为7.5 μL。
(24孔板的每孔建议用量为1 μl)。
注意事项:
RNAiMAX试剂在冰箱4℃保存,切记不能冷冻。
RNAiMAX试剂不宜在室温放置过久,因此在制备转染复合物前从冰箱拿出,加完后应立即放回4℃再进行后续操作。
转染复合物制备完成后室温孵育时间不得超过20分钟。
通过以上信息,您可以更好地了解Good RNAiMAX转染试剂的特点和使用方法。
需要注意的是,使用Good RNAiMAX进行转染时,要严格遵循制造商提供的说明书,以获得佳的转染效率和减少细胞损伤。此外,每次实验前好进行预实验,以确定佳的siRNA或miRNA浓度和转染条件。
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