产品描述：

胶原酶IV 是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和gan氨酸（Gly）之间的肽键。

使用说明：

本品为 IV 型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion

units），特别适用于胰岛组织的消化。

在 37℃，pH7.5 的条件下，5 h 内水解胶原产生相当于 1 µM L-liang氨酸的

酶量定义为 1 个酶活力单位。

IV 型胶原酶应以粉末形式在 2-8℃下保存，直到可以使用为止。可以将

IV 型胶yuan酶溶液等分并保存在 -20℃，但不应反复冻融。

使用方法：

1、胶原酶储存液的配制

向每管 100 mg 的胶原酶中加入 1 mL 的含 Ca2+、Mg2+的 HBSS（Hank’s pingheng盐溶液，含 Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成

100 mg/mL（即 100×）的储存液。然后用低蛋白结合性的 0.22 μm 的滤膜过

滤除菌，分装成小份量，然后于-20℃避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度

为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为 1-2 mg/mL，需要根据特定

的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的佳工作浓度。

2、组织的分离

1.使用无菌手术dao或剪刀将组织切成 3-4 mm 大小的组织块；

2.利用含 Ca2+、Mg2+的 HBSS 洗涤组织块数次；

3.加入足量的含 Ca2+、Mg2+的 HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需

要工作浓度；

4.于 37℃孵育 4-18 h。消化时使用水平摇床以及用 3 mM 的 CaCl2 补充消化

可以提高消化效率。

5.已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未全解离的

组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于 37℃继续孵育；

6.利用不含胶原酶的 HBSS 洗涤收集的细胞数次；

7.细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8.于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。 

3、器官灌注

1.向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2

有助于提高分离效率；

2.按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3.将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞

或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原

酶工作液于 37℃进一步孵育；

4.利用不含胶原酶的 HBSS 洗涤收集的细胞数次；

5.细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。 

关于胶原酶IV型的要点： 

功能：胶原酶IV型是一类金属蛋白酶，能够特异性地切割和降解IV型胶原蛋白，这在组织修复、肿瘤侵袭和转移等生理和病理过程中起着重要作用。

应用：在研究中，胶原酶IV型可用于研究细胞外基质的降解机制，以及在肿瘤生物学中研究肿瘤细胞如何通过降解基底膜来侵袭周围组织。

来源：胶原酶IV型可以由多种细胞类型产生，包括成纤维细胞、上皮细胞、肿瘤细胞等。 

活性：这种酶的活性通常依赖于特定的金属离子，如锌离子，它们是酶活性中心的一部分。 

抑制：在某些情况下，可能需要抑制胶原酶IV型的活性，以防止过度的组织损伤或控制病理过程。这可以通过使用特定的抑制剂来实现。 

临床意义：在某些疾病中，如肿瘤、炎症性疾病和自身免疫性疾病，胶原酶IV型的活性可能异常升高，这可能导致组织损伤和疾病进展。

研究：胶原酶IV型的研究有助于开发新的治疗方法，如通过抑制其活性来治疗某些疾病。 

产品形式：在实验室研究中，胶原酶IV型通常以商业化的酶制剂形式提供，可以用于各种生物学实验。