Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒试剂盒组份：

Annexin V-EGFP—————————100μl

Annexin V-EGFP结合液——————12ml

碘化丙啶染色液—————————220μl

Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。

Annexin V选择性结合磷酯酰丝an酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝an酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝an酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝an酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝an酸结合后可以阻断磷酯酰丝an酸的促凝血和促炎症反应活性。

用带有绿色荧光的荧光探针EGFP标记的Annexin V，即Annexin V-EGFP，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝an酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。

本试剂盒还提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞，呈现红色荧光。对于坏死细胞，由于细胞膜的完整性已经丧失，Annexin V-EGFP可以进入到细胞浆内，与位于细胞膜内侧的磷酯酰丝an酸结合，从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。

综上所述，用Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色后，正常的活细胞不被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色；凋亡早期的细胞仅被Annexin V-EGFP染色，碘化丙啶染色呈阴性；坏死细胞和凋亡晚期的细胞可以同时被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色。

储存条件：4℃避光，有效期6个月。

本试剂盒是用EGFP标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝an酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。一个包装的本试剂盒共可以检测20个样品。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

细胞生物学研究的常用技术有哪些：

1.显微技术：包括显微观察,显微操作.

2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.

3.细胞工程：细胞培养。

注意事项：

1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
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