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15291 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域。
美国AAT Bioquest公司。长年以来百萤生物与AAT Bioquest互补优势,为国内外广大用户提供光谱检测,底物显色,荧光发光技术等全系列解决方案。近年来,百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系;我们的服务宗旨:不断创新,为广大科研用户提供服务;主要分为以下几个产品线:
开发和生产荧光标记探针和发光探针。这些荧光标记探针和发光探针是用于标记生物大分子例如,蛋白质,核酸,碳水化合物的主要工具;
检测蛋白质,核酸和活细胞荧光和荧光探针;
新型各种酶活性荧光探针和发光探针(特别是用与研究蛋白酶,蛋白激酶和氧化还原酶荧光标记探针和发光探针);
开发用于分子信号转导研究试剂和试剂盒;
生物钙膜电位探针和神经生物学荧光标记探针和发光探针;
实验示例
概述
1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器在37ºC下孵育30-60分钟
3.洗涤细胞并将其保存在测定缓冲液中
4.使用PE通道通过流式细胞仪分析细胞
操作步骤
1.对于每个样品,在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中以1×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定佳细胞密度。对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。注意:JZL1707 NAD(P)H传感器对血清敏感,因此建议将细胞保存在您选择的无血清培养基或缓冲液中。或者,可以制备细胞并在常规培养基中处理。与JZL1707 NAD(P)H Sensor孵育时,请更改为无血清培养基或您选择的缓冲液。
在37ºC下将细胞与测试化合物一起孵育所需的时间,以刺激细胞内的NADH / NADPH。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。
2.将1 µL JZL1707 NAD(P)H传感器(组分A)加入0.5 mL细胞悬液中。在37ºC下孵育30-60分钟。注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100 µM NADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,然后与JZL1707 NAD(P)H Sensor工作溶液在37ºC共同孵育30分钟。分钟。有关详细信息,请参见图1。
3.用所需的缓冲液洗涤细胞一次。将细胞保存在测定缓冲液(组分B)中。
4.使用流式细胞仪监测PE通道的荧光强度。