人血清白蛋白(HSA)Site II结合测定试剂盒
人血清白蛋白(HSA)Site II结合测定试剂盒

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25402 人血清白蛋白(HSA)Site II结合测定试剂盒

型号
25402
参数
Ex?(nm):337 Em?(nm):495
西安百萤生物科技有限公司

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西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域。

美国AAT Bioquest公司。长年以来百萤生物与AAT Bioquest互补优势,为国内外广大用户提供光谱检测,底物显色,荧光发光技术等全系列解决方案。近年来,百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系;我们的服务宗旨:不断创新,为广大科研用户提供服务;主要分为以下几个产品线:

  1. 开发和生产荧光标记探针和发光探针。这些荧光标记探针和发光探针是用于标记生物大分子例如,蛋白质,核酸,碳水化合物的主要工具;

  2. 检测蛋白质,核酸和活细胞荧光和荧光探针;

  3. 新型各种酶活性荧光探针和发光探针(特别是用与研究蛋白酶,蛋白激酶和氧化还原酶荧光标记探针和发光探针);

  4. 开发用于分子信号转导研究试剂和试剂盒;

  5. 生物钙膜电位探针和神经生物学荧光标记探针和发光探针;







详细信息

人血清白蛋白(HSA)是人血浆中酸性药物的重要载体之一,并且已表现出可逆地结合大量不同的化合物。已为HSA确定了几个不同的配体结合位点。其中,Site II被确定为主要的药物结合位点之一。人血清白蛋白(HSA)Site II结合测定试剂盒是一种基于荧光的高通量测定法,用于确定小分子与HSA的结合。该测定法基于新型荧光探针HSA Blue™S2。它的特征是具有特别的光谱和结合特性,可结合至HSA的位点2。HSA Blue™S2在蛋白质结合状态和蛋白质未结合状态之间显示出较大的荧光强度差异。在HSA Blue™S2存在下,小分子竞争结合HSA导致荧光强度低。该测定法可用作高通量筛选工具,以确定在II位点与HSA的总结合。百萤生物为您提供优质的人血清白蛋白(HSA)Site II结合测定试剂盒


实验方案

样品分析方案

概述

向孔中添加HSA工作溶液(50 µL)和HSA Blue™S2工作溶液(50 µL)

向各个孔中添加各种浓度的测试药物(50 µL)

在室温下孵育15至45分钟

使用荧光酶标仪在Ex / Em = 365/480 nm(截止= 435 nm)下测量响应


储备溶液配制

HSA Blue™S2储备溶液
将100 µL DMSO(组分D)加入HSA Blue™S2(组分A)中并充分混合。
注意:将未使用的HSA Blue™S2储备溶液分装成一小份保存在-20°C下,以避免冻融循环。

工作溶液配制

1. HSA Blue™S2工作溶液
将50 µL HSA Blue™S2储备溶液添加到5 mL HSA分析缓冲液(组分B)中并充分混合。
注意:HSA Blue™S2工作溶液不应储存,应立即使用。
注意:5 mL HSA Blue™S2工作溶液足以用于一块96孔板。

2. HSA工作溶液
将250 µL HSA溶液(组分C)加入5 mL HSA分析缓冲液(组分B)中并充分混合。
注意:5 mL HSA工作溶液足以用于一个96孔板。

3.试药工作液
使用HSA分析缓冲液(组分B)将药物原液在3X工作溶液中稀释至所需浓度。
注意:对于此处提到的方案,一孔的建议体积为50 µL。


操作步骤

以下协议可用作指导,应根据需要进行优化。

  1. 在孔中加入50 µL HSA Blue™S2工作溶液。

  2. 在孔中加入50 µL HSA工作溶液。

  3. 在各自的孔中加入50 µL药物工作溶液。(总体积= 150 µL /孔)。

  4. 将样品在室温下孵育30分钟。

  5. 使用荧光酶标仪在Ex / Em = 365/480 nm(截止= 435 nm)处检测荧光的增加。



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产品参数

Ex?(nm) 337
Em?(nm) 495
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