ELISA试剂盒实验操作技巧实验前应严格要求

    根据ELISA试剂盒试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。  
（一）双抗体夹心法。
（二）双位点一步法。
（三）间接法测抗体。
（四）竞争法。
（五）捕获法测IgM抗体。
（六）应用亲和素和*。
    ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且zui初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色.

    按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏 水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
    ELISA试剂盒的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。 一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。为了优化灵敏度，建议孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。
    ELISA试剂盒的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。