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人B淋巴细胞急性白血病细胞 BALL-1产品运输方式:干冰或者活体细胞运输,本公司会保证细胞运输中的存活率本公司细胞株低价保证质量,免费快递直达。本公司拥有*的专业细胞培养技术人员为您的细胞培养准备详细的技术咨询。齐一生物科技(上海)有限公司:。Web:www.qiyibio。。com
人B淋巴细胞急性白血病细胞 BALL-1细胞培养方法
1、收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快。
2、收到细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理
3. 收到细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML培养基继续培养:超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心3分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4,将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。
5 、24小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,就可以传代了。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的*消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
6,贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37度 5%CO2 培养
7. 收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
培养基参考
500ml基础培养基(含:必需与非必需氨基酸、维他命、有机与无机成分、激素、生长因子与微量元素)、细胞生长添加剂、抗生素/抗菌素溶液或*/*(P/S)溶液、FBS,适合在饱和湿度为5%CO2与95%空气的培养箱中使用
磷酸盐缓冲液/Phosphate Buffer solution
碳酸盐缓冲液/Carbonate Buffer solution
TRIS-HC1缓冲液/三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液/TRIS-HC1 Buffer solution
醋酸钠醋酸缓冲液/Sodium acetate -Acetic acid Buffer solution
*钠盐酸缓冲液/Barbitone sodium-Hydrochloric acid Buffer solution
硼砂盐酸缓冲液/Borax-Hydrochloric acid Buffer solution
柠檬酸钠盐酸缓冲液/Sodium citrate-Hydrochloric acid Buffer solution
饱和苦味酸缓冲液/Saturated picric acid Buffer solution
Xmol/L盐酸缓冲液/Xmol/L-Hydrochloric acid Buffer solution
Xmol/L硫酸缓冲液/Xmol/L-Sulphuric acid Buffer solution
Xmol/L草酸缓冲液/Xmol/L-Oxalate Buffer solution
Hank′s液/Hank′s solution
任氏液
卢戈液
三(2-羧乙基)膦盐酸盐/三(2-羰基乙基)磷盐酸盐/三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐/三(2-羧乙基)磷盐酸盐/三(2-酰乙基)磷盐酸盐/TCEP
α-硫代甘油/3-巯基-1,2-丙二醇/1-硫代甘油/1-巯基甘油/1-硫甘油/1-硫代丙三醇/硫代丙三醇/硫代甘油/3-硫基-1,2-丙烷二醇/1-Thioglycerol
β-甘油磷酸二钠五水物/β-*五水物/甘油2-磷酸二钠盐五水物/ 2-甘油磷酸二钠盐五水物/β-磷酸甘油酯二钠盐五水合物/Disodium beta-glycerol phosphate pentahydrate
β-甘油磷酸二钠水合物/β-*水合物/甘油2-磷酸二钠盐水合物/2-甘油磷酸二钠盐水合物/β-磷酸甘油酯二钠盐水合物/BGP
α-甘油磷酸二钠/α-*/DL-α-*/α-Glycerophosphate disodium salt hexahydrate
α-甘油磷酸镁盐/DL-α-甘油磷酸镁盐/甘油磷酸镁/甘油磷酸酯镁盐/DL-α-Glycerol phosphate magnesium salt hydrate
矿物油/石蜡油/液体石蜡/白矿油/白油/白色矿物油/矿脂/凡士林油/白色油/白矿物油/矿油/Mineral oil/Paraffin oil
*/十八碳-9,12-二烯酸/(Z,Z)-9,12-十八烷二烯酸/顺,顺-9,12-十八碳二烯酸/亚麻油酸/十八碳-9,12,15-三烯酸/亚麻酸/Linoleic acid
油酸/顺式-9-十八烯酸/十八碳-9-烯酸/红油/十八烯酸/十八碳烯-9-酸/(Z)-9-十八烯酸/顺-9-十八烯酸/顺式十八烯-9-酸/Oleic acid
5-氟乳清酸/5-FOA
莽草酸/-(-)莽草酸/3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-甲酸/3α,4α,5β-三羟基环已烯羧酸/蟒草酸/卡瓦根提取物/Shikimic acid
棕榈油酸/顺式-9-十六(碳)烯酸/9-十六碳烯酸/顺-9-十六烯酸/软脂油酸/顺-9-十六碳烯酸/顺-9-十六碳烯酸/Palmitoleic acid
反式-1,2-环己二胺四乙酸/反-1,2-环己二胺-N,N,N',N'-四乙酸/1,2-环己二胺四乙酸/反式-1,2-二氨基环己烷-N,N,N′,N′-四乙酸/反-1,2-二氨基环己基四乙酸单水合物/1,2-二氨基环己四乙酸一水化物/(1,2-环己基二腈)四乙酸盐单水合物/DCTA/CyDTA