人皮肤成纤维细胞 HSF本公司代理美国ATCC，理德DSMZ，ScienCell德国细胞库，ECACC,ICLC,DSMZ的细胞株以及菌株等品牌细胞。齐一生物大量库存ATCC 细胞，癌细胞，正常细胞，*，质量保证，公司秉承“诚信、专业、高效”的经营理念为广大客户服务。欢迎各位老师！齐一生物科技(上海）有限公司：。Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

人皮肤成纤维细胞 HSF一、细胞操作参考书
二、生长特性：贴壁    悬浮
三、细胞生长条件：
培养基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
温度                       37℃
空气条件      5% CO2，,95% AIR
生长代数    P4
冻存条件    培养基70%、血清20%、DMSO10%
四、组成：
组份    规格
细胞一瓶    T25
细胞培养与操作说明    1份
五、细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如果细胞为贴壁细胞，，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基，培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时实验室，技术人员会跟进解决
2.贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（zui高不能超过20%），或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养
3.生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

六、细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1．吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml  0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在1-2min）
2．镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散
3．取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的*培养基，，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
4．注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意：（如使用公共实验室或初次接触细胞培养，建议添加双抗培养）
1.收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间zui长不宜超过72小时）
2.贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞放置培养箱孵育过夜到第二天再做消化传代
如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并实验室
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└ 脑静脉血管内皮细胞总DNA
└ 脑静脉血管平滑肌细胞总DNA
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└ 视网膜色素上皮细胞总DNA
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└ 支气管成纤维细胞总DNA
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