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人肾小球系膜细胞 HMC齐一生物科技(上海)有限公司是一家专业生产和销售各种生化试剂,细胞株、原代细胞、菌种、医药中间体,标准品和对照品的大型化学科技公司.齐一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio。。com
人肾小球系膜细胞 HMC细胞培养方法
1、收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快。
2、收到细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理
3. 收到细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML培养基继续培养:超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心3分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4,将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。
5 、24小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,就可以传代了。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
6,贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37度 5%CO2 培养
7. 收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
培养基参考
500ml基础培养基(含:必需与非必需氨基酸、维他命、有机与无机成分、激素、生长因子与微量元素)、细胞生长添加剂、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/链霉素(P/S)溶液、FBS,适合在饱和湿度为5%CO2与95%空气的培养箱中使用
美国ATCC简介:美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上zui大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
现已成为可信赖的活体微生物、细胞系等获得、保存和发放的国家资源中心。ATCC有29,000多种不同品系可靠的动物细胞和微生物培养体,它能满足各科学团体对可信赖品系的需要。仅1981年就有39,000多培养物发放给*的科学工作者,并成功地用冷冻和冷冻干燥的方法保存各种细胞品系。 ATCC是一个非(学会单位)无利润的公司,由各科学组织推选成员组成理事会进行管理。现有工作人员125人。参加的科学团体有:美国免疫协会、美国生物化学会、美国细胞生物学会、美国微生物学会、美国动物学会、美国遗传学会、原生动物学会和组织培养协会等16个学术组织。在ATCC可利用各种材料以及工具和设备进行广泛的研究。主要研究项目有:酶联免疫吸附分析技术(ELISA),真核细胞转录的调控,杂交瘤、淋巴类和髓类以及其他细胞系的建立,人突变细胞系的基因蛋白质,借助计算机进行鉴别分析,培养物的特征鉴别和保存技术的改进,关于化学致癌、致畸和致突变的。
大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA 试剂盒
大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA 试剂盒
大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA 试剂盒
大鼠白介素11(IL-11)ELISA 试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 试剂盒
大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA 试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 试剂盒
大鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA 试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 试剂盒
大鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA 试剂盒
大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 试剂盒
大鼠生长激素(GH)ELISA 试剂盒
大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 试剂盒
大鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 试剂盒
大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA 试剂盒
大鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA 试剂盒
大鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA 试剂盒
大鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA 试剂盒
大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA 试剂盒
大鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA 试剂盒
大鼠凋亡相关因子配体(FASL) ELISA 试剂盒
大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA 试剂盒
大鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA 试剂盒
大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 试剂盒
大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA 试剂盒
大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA 试剂盒
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA 试剂盒
大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫分析大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫分析体(sEPCR)ELISA 试剂盒
大鼠CD30分子(CD30)ELISA 试剂盒
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA 试剂盒
大鼠β细胞素(BTC)ELISA 试剂盒
大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 试剂盒
大鼠血管生长素(ANG)ELISA 试剂盒
大鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA 试剂盒
大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 试剂盒
大鼠白介素9(IL-9)ELISA 试剂盒
大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA 试剂盒
大鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA 试剂盒
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA 试剂盒
大鼠雌激素(E)ELISA 试剂盒
大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 试剂盒
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 试剂盒
大鼠脂联素(ADP)ELISA 试剂盒
大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA 试剂盒
大鼠醛固酮(ALD)ELISA 试剂盒
大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA 试剂盒
大鼠前列腺素F(PGF)ELISA 试剂盒
大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 试剂盒
大鼠内皮素1(ET-1)ELISA 试剂盒
大鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA 试剂盒
大鼠抵抗素(Resistin)ELISA 试剂盒
大鼠催乳素(PRL)ELISA 试剂盒
大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA 试剂盒
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒
大鼠雌二醇受体(ER)ELISA 试剂盒
大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA 试剂盒
大鼠大内皮素(Big ET)ELISA 试剂盒
大鼠大内皮素(Big ET)ELISA 试剂盒
大鼠迟现抗原(VLA)ELISA 试剂盒
大鼠降钙素(CT)ELISA 试剂盒
大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA 试剂盒
大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA 试剂盒
大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA 试剂盒
大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒
Phenyl Sefinose 6 Fast Flow (low sub,LS) 标准载量苯基疏水色谱柱料
Phenyl Sefinose 6 Fast Flow (high sub,HS) 高载量苯基疏水色谱柱料
Phenyl Sefinose 6 Fast Flow (high sub,HS) 高载量苯基疏水色谱柱料
Blue SefinoseTM 6 Fast Flow 兰色色谱柱料
Blue SefinoseTM 6 Fast Flow 兰色色谱柱料
Protein G SefinoseTM Resin (Settled Resin)
Protein G SefinoseTM Resin (Settled Resin)
NHS-activated SefinoseTM 4 Fast Flow
SG-Arginine-C?
SG-Aspartic-N?
SG-Chymotrypsin?
SG-Glutamic-C?
SG-Lysine-C?
SATA
Protein Stains L无毒型蛋白质快速染色试剂盒
BCA Protein Assay KitBCA蛋白质定量检测试剂盒
Bradford Protein Assay KitBradford 蛋白质定量检测试剂盒
Bradford Protein Assay KitBradford 蛋白质定量检测试剂盒
Modified Bradford Protein Assay Kit改良型Bradford蛋白浓度测定试剂盒
Modified BCA Protein Assay Kit 改良型BCA蛋白浓度测定试剂盒
Micro BCA Protein Assay KitBCA法微量蛋白浓度测定试剂盒
Non-Interference Protein Assay Kit非干扰型蛋白浓度测定试剂盒
Lowry Protein Assay Kit福林酚蛋白浓度测定试剂盒
Lowry Protein Assay Kit福林酚蛋白浓度测定试剂盒
Modified Lowry Protein Assay Kit 改良型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒
Stable Lowry Protein Assay Kit 稳定型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒
BSA牛血清白蛋白溶液
Triton X-405
Triton X-405
Folin-Phenol Reagent 福林酚蛋白浓度测定试剂
Sulfo-NHS-Biotin
Sulfo NHS LC Biotin
NHS LC Biotin
Sulfo NHS
Sulfo NHS
Iodination Reagent
Iodination Reagent
Traut's Reagent
Western-Blot-Re-Probe SolutionWestern Blots---印迹膜再生液