【试剂盒名称】

（人基质金属蛋白酶4（MMP-4）ELISA试剂盒）

【试剂盒用途】

定量检测人血清、血浆及相关液体样本中（人基质金属蛋白酶4（MMP-4）ELISA试剂盒）的含量。

【检测范围】

0.25-8pg/mL

【规格】

96人份/盒

【试剂盒组成】

备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：8、4、2、1、0.5、0.25 pg/mL

【操作步骤】

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；每孔再加入酶标工作液100μL；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。

6、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。

7、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。

8、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。

9、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【注意事项】

1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

5、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。

6、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。

7、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

人常见ELISA试剂盒系列
人：IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等
大鼠常见ELISA试剂盒系列
大鼠：TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等
小鼠常见ELISA试剂盒系列
小鼠：IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等
另有兔、猪、猴、鸡、鸭、羊、植物等多种种属ELISA试剂盒，所有试剂盒经过充分验证，保证有效且重复性佳。