参数规格：
产品名称：副猪嗜血杆菌（HPS）PCR检测试剂盒
产品货号：CP100177
产品规格：48T
产品分类：
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
链格孢菌CD3抗体Human MT-CO1(Cytochrome c oxidase subunit 1) ELISA Kit人抗染色体抗体(anti-chromosome Ab)免疫试剂盒

枯草芽孢杆菌CP2相关转录抑制因子1抗体Human LAMB1(Laminin subunit beta-1) ELISA Kit人抗缩酶(ALD)自身抗体免疫试剂盒

胶孢电压依赖型N型钙通道α1B抗体Human FBN2(Fibrillin-2) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗体(IgM)免疫试剂盒

科贝特氏菌属烟碱型乙酰受体A2(神经型)抗体Human TGFBR1(TGF-beta receptor type-1) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗体(IgG) 免疫试剂盒

鲁氏毛霉C型凝集素结构域家族1成员A抗体Human PRKCE(Protein kinase C epsilon type) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗体(IgA)免疫试剂盒

蜂房类芽孢杆菌γ干扰素诱导单核因子抗体Human PRKCG(Protein kinase C gamma type) ELISA Kit人抗浦肯野抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)免疫试剂盒

边缘无浆体（隆德株）血小板因子4抗体Human NRGN(Neurogranin) ELISA Kit人抗平滑肌抗体(ASMA)免疫试剂盒

球孢白僵菌血小板趋化因子7蛋白抗体Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA Kit人抗皮肤抗体(ASA)免疫试剂盒

缺陷短波单胞菌干扰素诱导T趋化因子抗体Human IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) ELISA Kit人抗旁瘤抗原Ma2(PNMA2)抗体免疫试剂盒

金针菇B-淋巴趋化因子抗体Human DSG3(Desmoglein-3) ELISA Kit人抗凝脂(PL)抗体(IgM)免疫试剂盒

黑腐病黄色单胞菌凋亡加强结构域蛋白12抗体Human NOX1(NADPH oxidase 1) ELISA Kit人抗凝脂(PL)抗体(IgG)免疫试剂盒

冷水金黄杆菌凋亡加强结构域蛋白14抗体Human LAD1(Ladinin-1) ELISA Kit人抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)免疫试剂盒

黑曲霉肌酸激酶M型抗体Human ITGA5(Integrin alpha-5) ELISA Kit人抗-磷脂酰复合物(RTH-PS)抗体免疫试剂盒

拟盘多毛孢属NK受体BY55抗体Human XBP1(X-box-binding protein 1) ELISA Kit人抗III(AT III)免疫试剂盒

红菇CD229抗体Human DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA Kit人抗Ⅲ抗体免疫试剂盒

Pseudomonas guariconensis 凝集胎盘蛋白1抗体Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) ELISA Kit人抗酿酒酵母抗体(IgG)免疫试剂盒
副猪嗜血杆菌（HPS）PCR检测试剂盒小孢根霉华变种Rhizopus│microsporus var. chinensis 质量规格：>98%雌酮试剂盒青阳参苷元

链霉菌Streptomyces│sp. 质量规格：AR,>98%雌三试剂盒荞麦碱

麦角菌Claviceps│purpurea 质量规格：>98%，BC雌激素诱导蛋白PS2 elisa试剂盒七叶皂苷

美国大钟菇Agricarius│bisporus (Lange) Imbach 质量规格：>98%，BR雌激素受体β试剂盒米那普仑盐酸盐

果生链核盘菌Monilinia│fructigena Honey 质量规格：85~90%，BR雌激素硫酸转移酶试剂盒迷迭香精油

栗酒裂殖酵母Schizosaccharomyces│pombe 质量规格：88~92%，USP雌激素试剂盒莱菔素

多孢木霉Trichoderma│polysporum 质量规格：> 98%,AR雌二受体试剂盒苦味素

枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格：Ind Grade雌二试剂盒糠酸

糙皮侧耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 质量规格：>98%,分子生物学级垂体腺苷酸环化酶激活肽试剂盒卡维丁
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。