参数规格：
产品名称：转基因植物NOS终止子PCR检测试剂盒
产品货号：CP100005
产品规格：50T
产品分类：荧光-PCR法
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
伯克氏菌21号染色体开放阅读框63抗体Human ETS1 ELISA Kit兔子(GSH)免疫试剂盒

孟氏假单胞菌4号染色体开放阅读框52抗体Human EXOSC1 ELISA Kit兔子睾酮(T)免疫试剂盒

毛胡枝子根瘤菌4号染色体开放阅读框40抗体Human ETS2 ELISA Kit兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫试剂盒

居岩牙殖球菌Cullin3抗体Human EXOSC10 ELISA Kit兔子高密度脂蛋白胆固(HDL-C)免疫试剂盒

ATCC 35056分裂周期同源蛋白40抗体Human ETV4 ELISA Kit兔子肝生长因子(HGF)免疫试剂盒

白蘑卷曲螺旋结构域蛋白106抗体Human ETV6(ETS translocation variant 6) ELISA Kit兔子甘油-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)免疫试剂盒

成团泛菌染色质修饰蛋白1A抗体Human EVI2A ELISA Kit兔子干因子/肥大生长因子(SCF/MGF)免疫试剂盒

枯草芽孢杆菌叶绿体伴侣蛋白抗体（苹果）Human ETV5 ELISA Kit兔子二氧化酶(DAO)免疫试剂盒

酿酒酵母分裂周期蛋白20B抗体Human ESRP2 ELISA Kit兔子端粒酶(TE)免疫试剂盒

污黑腐皮壳周期调控蛋白D1抗体Human ESRRB ELISA Kit兔子低密度脂蛋白胆固(LDL-C)免疫试剂盒

东京根霉周期蛋白B1结合蛋白1抗体Human ESX1 ELISA Kit兔子蛋白聚糖4(PRG4)免疫试剂盒

放射形根瘤菌周期调控因子14A抗体Human ETF1 ELISA Kit兔子蛋白聚糖(ACAN)免疫试剂盒

异常威克汉姆酵母第七号染色体开放阅读框12抗体Human ETFA ELISA Kit兔子胆固酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒

副干酪乳杆菌碳酸酐酶11抗体Human ERO1L ELISA Kit兔子单核趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒

Bacillus aryabhattaiα酪蛋白抗体Human ERP29 ELISA Kit兔子催乳素(PRL/LTH)免疫试剂盒

白鳞马勃周期调控相关蛋白1Human ERO1LB ELISA Kit兔子促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒
转基因植物NOS终止子PCR检测试剂盒海绵假单胞菌Pseudomonas│pachastrellae 质量规格：>98.0%,BR类风湿因子试剂盒红-龙胆二糖苷;

链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格：>98.0%(HPLC)4000万IU/g类泛素蛋白ISG15 elisa试剂盒决明素;1,7-Dihydroxy-2,

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：>99%,BR,可用于培养 类白抗原G试剂盒红景天素;Rhodiosin; Herb

弧菌Vibrio│sp. 质量规格：>97%,BR,无水物类白抗原E试剂盒;2,6-Dihydroxypur

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：>98.5%,二水合物类白抗原B27试剂盒湖贝甲素;Hupehenine

扁桃拟茎点霉Phomopsis│amygdaliana Canonaco 质量规格：>98.5%,无水,EP雷帕霉素靶蛋白试剂盒黑芥子硫苷酸一水;Sinigrin m

毛壳菌属Chaetomium│sp. 质量规格：纯度>99.0%,BR酪氨酰tRNA合成酶试剂盒旱莲苷A;Ecliptasaponin

南方盐单胞菌Halomonas│meridiana 质量规格：标准品用于含量测定酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1试剂盒花椒酚;Xanthotol

苏云金芽孢杆菌加拿大亚种Bacillus│thuringiensis subsp. canadensis de Barjac and Bonn 质量规格：≥98.0%,BR羟化酶试剂盒黄腐酚; Xanthohumo
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。