实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
参数规格：
产品名称：枯草芽孢杆菌PCR检测试剂盒
产品货号：CP100344
产品规格：48T
产品分类：恒温荧光法
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
Pseudomonas核膜糖蛋白210抗体Human TRIM25 ELISA Kit大鼠褪黑素(MT)免疫试剂盒

庆丰链霉菌GADD153抗体Human TRIM24 ELISA Kit大鼠突触体素/突触素(Syp/SYN)免疫试剂盒

Rummeliibacillus stabekisiiG蛋白偶联受体57抗体Human TRIM29 ELISA Kit大鼠突触蛋白1(Syn1)免疫试剂盒

黑木耳GSK-3结合蛋白FRAT2抗体Human TRIM27 ELISA Kit大鼠透明质酸酶1(HYAL1)免疫试剂盒

枯草芽孢杆菌磷酸化内收蛋白gamma抗体Human DDO(D-aspartate oxidase) ELISA Kit大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)免疫试剂盒

华根霉生长因子受体结合适应蛋白抗体Human TRIM31 ELISA Kit大鼠透明质酸(HA)免疫试剂盒

金黄色葡萄球菌*GARNL3蛋白抗体Human TRERF1 ELISA Kit大鼠铜蓝蛋白(CP)免疫试剂盒

杏鲍菇Tuberin样蛋白1抗体Human TRIB2 ELISA Kit大鼠同型半(Hcy)免疫试剂盒

铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)X连锁Charcot-Marie-Tooth变相关蛋白抗体Human TRIM11 ELISA Kit大鼠铁蛋白(FE)免疫试剂盒

乳酸菌计数质控样品甘氨酰核苷酸合成酶抗体Human SRSF3(Serine/arginine-rich splicing factor 3) ELISA Kit大鼠天氨基转移酶(AST)免疫试剂盒

卷枝毛霉卷枝变型生长休止特定蛋白2抗体Human TRIM15 ELISA Kit大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)免疫试剂盒

栖土曲霉G蛋白γ11/Gγ11 抗体Human TRIM14 ELISA Kit大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)免疫试剂盒

白假丝酵母磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体Human TRIM17 ELISA Kit大鼠糖原磷酸化酶(GP)免疫试剂盒

芽孢杆菌属γ-谷氨酰转肽酶7重链抗体Human TRIM23 ELISA Kit大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)免疫试剂盒

炭疽芽胞杆菌生长激素2/胎盘特异性生长激素抗体Human TRIM2 ELISA Kit大鼠糖原合成酶激酶(GSK)免疫试剂盒

拜氏梭菌高尔基体相关蛋白GM130抗体Human TRIM25 ELISA Kit大鼠糖原合成酶免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌PCR检测试剂盒木贼镰孢Gibberella│intricans Wollenw. 质量规格：>98.0%(HPLC)(T)人参皂苷Re

黑根霉Rhizopus│niger 质量规格：荧光染料人参皂苷Rc

桔青霉Penicillium│citrinum 质量规格：>95.0%(E)人参皂苷Rh3

灰黄青霉Penicillium│griseofulvum 质量规格：>95.0%(T)人参皂苷Rh2

气单胞菌Aeromonas│sp. 质量规格：>98.0%(T)人参皂苷Rh1

大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

马氏副球菌Paracoccus│marcusii 质量规格：螯合剂人参皂苷Rg2

木贼镰孢菌Gibberella│intricans Wollenw. 质量规格：>98.0%(T)人参皂苷Rg1

北极假交替单胞菌Pseudoalteromonas│arctica 质量规格：>97.0%(T)人参皂苷Rb3