原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。

大鼠子宫颈上皮细胞

商品属性：

细胞简介：

大鼠子宫颈上皮分离自子宫颈组织；子宫颈位于子宫下部，近似圆锥体，上端与子宫体相连，下端深入阴道。阴道顶端的穹隆又将子宫颈分为两部分：宫颈突入阴道的部分称宫颈阴道部，在阴道穹隆以上的部分称宫颈阴道上部。宫颈的中央为前后略扁的长梭性管腔，其上端通过宫颈内口与子宫腔相连，其下端通过宫颈外口开口于阴道。内外口之间即宫颈管。宫颈的大小与宫体比例随年龄及内分泌状态等而变化；宫颈壁由黏膜、肌层和外膜组成。子宫颈可有多种疾病，包括胚胎发育异常、炎症、瘤样病变、良性肿瘤、恶性肿瘤、损伤、宫颈性不孕、辅助生育技术、宫颈与性、宫颈妊娠等许多问题，体外培养的子宫颈上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠子宫颈上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠子宫颈上皮采用先胶原酶消化、后组织贴块法，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

鸭子白介素12(IL-12)ELISA试剂盒 96T/48T

Human aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 人抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒

Humanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforACV-A(HumanActivinA)ELISAKit人活化素A规格：48T/96T

血液组织蛋白酶B(CATHEPSINB)活性荧光定量检测试剂盒20次

mouseprolactin,PRLELISAKit小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乙醇脱氢酶（ADH）测定试剂盒（紫外比色法）

微量游离血红蛋白（FHb）测定试剂盒（比色法）

超微量Na+K+–ATP酶测定试剂盒

测定试剂盒（紫外比色法）

大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-1 ELISA Kit

Rabbit collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒

ELISA 小鼠巨嗜细胞趋化蛋白-1(mouse MCP-1) 48T/96T 进口分装

CLIAKitforIL-23(HumanIerleukin23)ELISAKit人白介素23规格：48T/96T

通用型抗酸性0酸酶(SACP)活性比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitGP-ⅡbⅢa大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa规格：48T/96T

HA重组甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

PAX9(Paired box gene 9 0.5mgPAX9(Paired box gene 9) 配对盒基因9抗原

CSF2RB重组人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (His 标签) Protein

CALCB Protein Human 重组人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 标签)

BMPR2 Protein Human 重组人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 标签)

大鼠子宫颈上皮细胞PAX9(Paired box gene 9 0.5mgPAX9(Paired box gene 9) 配对盒基因9抗原

CALCB Protein Human 重组人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 标签)

HA重组甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

BMPR2 Protein Human 重组人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 标签)

CSF2RB重组人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (His 标签) Protein