本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！

细胞简介：

猪脑微血管周分离自脑微血管；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。周细胞（pericyte）又称Rouget细胞和壁细胞，是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞，可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中，通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯，监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外，周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用，其多功能性是目前研究的热点之一，所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜，基膜上有多种细胞连接，包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控；毛细血管受损时，周细胞还可增殖，分化为内皮细胞和成纤维细胞。

原代细胞培养条件：

‌温度‌：通常在37℃下进行，以模拟体内温度。

‌pH值‌：培养液的pH值应保持在7.2~7.4之间，以维持细胞的正常生理状态。

‌气体环境‌：在含有5% CO2的培养箱中进行，以促进细胞生长。

‌培养基‌：使用含有适当营养成分的培养基，如Eagle's MEM、DMEM等。

‌无菌操作‌：整个培养过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。

方法简介：

实验室分离的猪脑微血管周经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

实验室分离的猪脑微血管周采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml）

培养基：基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞培养的具体操作步骤如下：

‌组织处理‌：将动物组织从机体中取出，剪碎后用等消化酶处理，使其分散成单个细胞。

‌细胞计数‌：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。

‌接种培养‌：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。

‌换液和传代‌：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。

原代细胞的4种培养方法：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用

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