原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。

大鼠子宫内膜上皮细胞

商品属性：

细胞简介：

大鼠子宫内膜上皮分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜，由上皮（属单层柱状上皮，有分泌细胞和纤毛细胞二种）和固有膜（由结缔组织构成，其内有大量的星形细胞，称为基质细胞）组成，子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层，功能层较厚，约占内膜厚度的4/5；基底层较薄较致密，约占1/5，功能层可剥脱，而基底层不可剥脱。子宫内膜上皮细胞主要功能：①子宫内膜亦称子宫黏膜，是指构成哺乳类子宫内壁的一层；②子宫内膜对动情素和孕激素都起反应，因此可随着性周期（发情周期、月经周期）发生显著的变化。子宫内膜与胚胎附植密切相关，在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎与母体“对话”的过程中，子宫内膜上皮细胞充当了极其重要的角色。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的内层，位于子宫腔面，在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官，子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。体外培养的子宫内膜上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠子宫内膜上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠子宫内膜上皮采用先胶原酶消化、后组织贴块法，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai prothrombin aibody (aPT1/aPT2) ELISA Kit 人抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒

HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 人胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforACV-A(MouseActivinA)ELISAKit小鼠活化素A规格：48T/96T

血液组织蛋白酶L(CATHEPSINL)活性荧光定量检测试剂盒20次

MouseProgesterone,PROGELISAKit小鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

胰岛素样生长因子结合蛋白5   英文名称：   human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGFBP5

胰岛素   英文名称：   Human Insulin   规格：   48T/96T   英文缩写：   INS

细胞间粘附分子1   英文名称：   Human Iercellular Adhesion Molecule 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   ICAM-1

干扰素α受体   英文名称：   Human Ierferon α Receptor   规格：   48T/96T   英文缩写：   IFNαR

大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)ELISA试剂盒 ，英文名： CBS ELISA Kit

Rabbit collagen type III (Col III) ELISA Kit 兔子Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒

百日咳杆菌(BP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMMP-2/GelatinaseAELISAKit大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A规格：48T/96T

体液基质金属蛋白酶(MMP-2)免疫捕获检测试剂盒20次

ELISAKitPSA犬前列腺特异性抗原规格：48T/96T

HGF重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗原

IL23重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CALML3 Protein Human 重组人 CALML3 蛋白 (His 标签)

LTA4H Protein Mouse 重组小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 标签)

大鼠子宫内膜上皮细胞EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗原

CALML3 Protein Human 重组人 CALML3 蛋白 (His 标签)

HGF重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

LTA4H Protein Mouse 重组小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 标签)

IL23重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein