原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

人宫颈癌成纤维细胞

商品属性：

细胞简介：

人宫颈癌组织源成纤维分离自患有宫颈癌病人的宫颈癌组织；宫颈癌也称子宫颈癌，指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤，是女性常见恶性肿瘤之一，发病率位于女性肿瘤的第二位。宫颈癌可向邻近组织和器官直接蔓延，向下至阴道穹窿及阴道壁，向上可侵犯子宫体，向两侧可侵犯盆腔组织，向前可侵犯膀胱，向后可侵犯直肠。也可通过淋巴管转移至宫颈旁、髂内、髂外、腹股沟淋巴结，晚期甚至可转移到锁骨上及全身其他淋巴结。血行转移比较少见，常见的转移部位是肺、肝及骨。肿瘤微环境即肿瘤细胞生存的外部环境，由不同种类的非肿瘤性的细胞与细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）构成，包括纤维细胞，免疫细胞，内皮细胞，间充质干细胞等，肿瘤细胞通过调控这些间质细胞，创造出有利于自身侵袭转移的条件，从而使得肿瘤得到进展。越来越多的证据表明，肿瘤微环境的改变在肿瘤进展中扮演着重要的角色。在肿瘤微环境中，研究最多也是最主要的间质细胞是肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）。CAFs 主要由肿瘤周边的正常成纤维细胞和成纤维细胞样细胞演化而来。宫颈癌组织源成纤维细胞多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。刚分离的宫颈癌组织源成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的人宫颈癌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的人宫颈癌成纤维采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

小鼠诱导型合成酶(iNOS)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai ophoblast aibody (ATA) ELISA Kit 人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒

Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit 轻链lambda(λ-IgLC)ELISA试剂盒 96T/48T 分装

CLIAKitfor8-OHdGELISAKit大鼠8羟基脱氧鸟苷规格：48T/96T

乙酰酯酶活性抑制剂筛选比色法检测试剂盒20次

MouseMucin-7,MUC7ELISAKit小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

血管生长素   英文名称：   Angiogenin   英文缩写：   ANG   规格：   48T/96T

血管生成素-2   英文名称：   Angiopoietin-2   英文缩写：   ANG2   规格：   48T/96T

血管生成素相关生长因子   英文名称：   Angiopoietin Growth Factors   英文缩写：   AGF   规格：   48T/96T

载脂蛋白P   英文名称：   Apolipoprotein P   英文缩写：   ApoP   规格：   48T/96T

大鼠胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒 ，英文名： CCK ELISA Kit

Porcine platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 猪血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒

ELISA 小鼠Active Caspase-7 48T/96T 分装

CLIAKitforLPLELISAKit大鼠脂蛋白脂酶规格：48T/96T

通用型1毫升1厘米光径玻璃比色皿1个

ELISAKitDEV鸡病毒性肠炎病毒规格：48T/96T

SERPINA11重组小鼠 SerpinA11 蛋白 (His 标签) Protein

cath-L/CL peptide 组织蛋白酶L抗原 0.5mgcath-L/CL peptide 组织蛋白酶L抗原

CSF1R重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CCL21 Protein Human 重组人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

PDGFRA Protein Rat 重组大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His 标签)

人宫颈癌成纤维细胞cath-L/CL peptide 组织蛋白酶L抗原 0.5mgcath-L/CL peptide 组织蛋白酶L抗原

CCL21 Protein Human 重组人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

SERPINA11重组小鼠 SerpinA11 蛋白 (His 标签) Protein

PDGFRA Protein Rat 重组大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His 标签)

CSF1R重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 标签) Protein

原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。