原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

‍兔子宫平滑肌细胞

商品属性：

细胞简介：

兔子宫平滑肌分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚，由成束或成片的平滑肌组成，肌束间以结缔组织分隔。子宫平滑肌具有收缩功能，收缩受激素的调节，其收缩活动有助于向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出。子宫平滑肌层含有大量的血管，如果平滑肌层细胞过度生长，势必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能：①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态，在孕期能大化的扩张子宫容积，保证胎儿孕育环境；②平滑肌细胞有收缩舒张能力，在生产时能形成生理性的缩腹环，推动胎儿向下移动，辅助生产。

方法简介：

公司实验室分离的兔子宫平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的兔子宫平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

小鼠神经激肽B(NKB)ELISA 试剂盒 96T/48T

Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒

HumanPlaceaCadherin,P-cadELISAKit 人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

GoatIerleukin10,IL-10ELISA试剂盒山羊白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母菌ATP生物发光法定量检测试剂盒50次

MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit小鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠皮质/上腺(CO)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠肌球蛋白轻链激酶(MYLK)ELISA试剂盒 ，英文名： MYLK ELISA Kit

Mouse tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA Kit 小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒

RatPeosidineELISAKit 大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFIIELISAKit大鼠Ⅱ规格：48T/96T

细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒20次

Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

TF重组野猪 Transferrin / TF 蛋白 (His 标签) Protein

OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 0.5mlOLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原

TNFRSF10A重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His 标签) Protein

COL5A2 Protein Human 重组人 COL5A2 蛋白 (Fc 标签)

MMP8 Protein Mouse 重组小鼠 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 标签)

兔子宫平滑肌细胞OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 0.5mlOLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原

COL5A2 Protein Human 重组人 COL5A2 蛋白 (Fc 标签)

TF重组野猪 Transferrin / TF 蛋白 (His 标签) Protein

MMP8 Protein Mouse 重组小鼠 MMP8 / CLG1 蛋白 (His 标签)

TNFRSF10A重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His 标签) Protein

原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。