原代细胞培养条件：

‌温度‌：通常在37℃下进行，以模拟体内温度。

‌pH值‌：培养液的pH值应保持在7.2~7.4之间，以维持细胞的正常生理状态。

‌气体环境‌：在含有5% CO2的培养箱中进行，以促进细胞生长。

‌培养基‌：使用含有适当营养成分的培养基，如Eagle's MEM、DMEM等。

‌无菌操作‌：整个培养过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。

本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！

细胞简介：

兔棕色脂肪干分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪干细胞（ADSCs）是一种具有多向分化潜能的干细胞，主要恢复组织细胞的修复功能，促进细胞的再生，恢复年轻面容的同时，身体机能也得到充分改善，改善亚健康、早衰等疾病，由内而外真正的抵抗衰老。脂肪干细胞具有很多优点：①具有自我更新及多向分化的潜能；②来源充足；③对供区的创伤较小；④获得率及体外扩增速率高。脂肪干细胞是目前被广泛应用于组织工程领域中理想的种子细胞。

方法简介：

实验室分离的兔棕色脂肪干经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

实验室分离的兔棕色脂肪干采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞培养的具体操作步骤如下：

‌组织处理‌：将动物组织从机体中取出，剪碎后用等消化酶处理，使其分散成单个细胞。

‌细胞计数‌：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。

‌接种培养‌：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。

‌换液和传代‌：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。

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原代细胞的4种培养方法：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用