登革热试剂盒是由一种酶联扩大的两步法免疫检测系统。在此实验中，将登革热阴性质控、阳性质控和未知浓度的血清样品用样品稀释液稀释，然后加入到包被 了抗人IgM抗体的微孔中温育，之后分别加入登革热源性重组抗原DENVRA和正常细胞抗原（NCA）进行温育。温育并洗板后，用HRP标记的DEN特异 性抗体处理。第二次温育并洗板后，加入TMB底物液进行温育。之后再加入酸性终止液，450nm处测OD值可确定底物反应的程度。当高于一定数值时（临界 值），样品的吸光度值可确定样品中是否存在登革热抗体。

　　登革热试剂盒样品的采集与准备：

　　1）此实验必须用血清来做。全血和血浆样本不能直接检测。

　　2）不要将不同批次的试剂混乱

　　3）不要加热热灭活的试验血清

　　4）实验前将所有试剂平衡至室温，温度的改变会对试验有影响

　　5）避免反复冻融样品血清

　　6）直接用干净的枪头从试剂瓶中移去试剂，不能转移，避免污染

　　7）不用的板条应立即放回至密封袋中保存

　　8）不要使用任何过期的试剂

　　9）避免试剂暴露受热或阳光直射

　　10）有些试剂可能会产生沉淀，使用前一定要混匀

　　11）洗涤过程不完整会对试验结果产生影响

　　12）为了减少由于孵育时间的差异而引起的漂移，建议底物液和终止液加入的时间和速度要*

　　13）避免试剂中有微生物污染，尤其是酶联物

　　14）每一次吸取试剂，标准品，质控品时都应用干净的枪头

　实验步骤：

　　将所有的试剂成分和样品都平衡至室温。实验前反复倒置以混合试剂和样品。

　　试剂准备：

　　1）1X洗涤液的配制：用生物学或高纯度水将10倍浓缩型的洗涤液稀释成1X的洗涤液。为了制备即用型的洗涤缓冲 液，我们可以将120ml 10倍浓缩的洗涤液加入到1080ml蒸馏水或去离子水中，冲洗掉所有晶体，旋涡混合溶液以至所有晶体都溶解掉。制备好的洗涤液可在室温下稳定储存6个月。使用前请检查洗涤液是否被污染。

　　2）包被板的准备：将实验所需数目的板条置于板架上。将剩余的板条立即装入包装袋中，并储存于2-8℃的环境下，有效期内稳定。

　　用于定性检测血清中登革病毒（血清型1、2、3及4型）的IgG抗体，用于临床实验室对具有持续发烧的登革感染症状或接触史的患者的辅助性诊断。