elisa实验

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2024-07-30 09:48:33
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伊莱博生物科技(上海)有限公司

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产品简介

elisa实验技术服务内容:您只需将需要检测的动物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)种类和检测指标(介素类、因子类)及标本数量(48T/96T)告知我司业务人员即可。

详细介绍

elisa实验技术服务质量:伊莱博生物提供的检测用所有试剂,适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,灵敏度*。

注意事项:在收集标本前都有一个完整的计划,清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

组织标本:切割标本后,称取重量。加入量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

elisa实验步骤:

1.包被抗原:稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液,多肽浓度2ug/ml,0.1ml/孔,4ºC过夜,洗净。

2.1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭,0.1ml/孔,37ºC1h,洗净。

3.稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔,37ºC 30分钟,洗净。

4.稀释辣根过氧化物每标记的二抗0.1ml/孔,37ºC 40分钟,洗净。

5.显色:TMB显色

A液:四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍.

B液:5ul双氧水加蒸馏水12.5ml 。终止液:2N硫酸

A液、B液各一滴,比光显色10分钟,终止液一滴。

6.450nm 波长测OD值

伊莱博生物拥有丰富的研究经验,具备完善的系统化管理能力和科研服务体系。目前已自建细胞、分子、病理等实验平台近1000平方米,拥有的仪器设备、细胞库、样本保存库等。动物实验中心近1800平方米,可满足同时饲养清洁级和SPF级动物。核心实验技术团队主要来自大学、复旦大学、上海交通大学等重点高校及科研机构,能够为客户提供研究方案策划、项目实施及项目深度分析等方面的技术支持。公司目前参与研究项目已经涵盖心脑血管、肿瘤、内分泌、生殖、免疫、神经等诸多领域。



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