线粒体膜电位(MMP)检测实验原理

线粒体在产生能量时会将电化学势能储存于线粒体内膜，在内膜两侧，若质子及其他离子浓度的不对称分布就会形成线粒体膜电位。

线粒体膜电位(MMP)检测服务介绍

大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（MMP）的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。

实验流程

1.细胞培养；

2.用适当的方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性依照组合阳性对照组，收集细胞；

3.用PBS洗涤细胞三次，收集不多于1×106的细胞；

4.取100μL10×Incubation Buffer加900μL灭菌去离子水稀释成1×Incubation Buffer，混匀并预热至37℃；

5.吸取500μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，涡旋混匀配成JC-1工作液；

6.取500μL JC-1工作液将细胞均匀悬浮，37℃，5% CO2的培养箱中孵育15~20min；

7.室温离心（2000rpm,5min）收集细胞，用1×Incubation Buffer洗两次；

8.吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新悬浮细胞；

9.流式细胞仪检测，分析。