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上海市所在地
产品名称:阿尔玛蓝试剂盒
英文名称:Alamar Blue Cell Viability Assay Kit
编号:XG-P2325
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
包装规格及成分:
编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
试剂二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
试剂三 | 源性成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
试剂九 | 使用手册 | 400 uL(红盖) |
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线
威尔酵母
热带念珠菌ATCC750冻干粉
水螺菌
双孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)
泡盛曲霉
叶柄粘球菌wo7ium2-sulfonateβ-奈磺酸钠500毫克BR,99%
93106-60-6Enrofloxacin
v 42137-24-6
异丙酯 Isopropyl ate,98% 108-23-6 25ML 通用试剂
碳化硅/绿色碳化硅/金刚砂/耐火砂/Silicon carbide CP,98.5% 100克 国产/进口EC-MUG培养基100g用于生活饮用水及其水源水中大肠埃希氏菌的检测 进口分装 L-异亮酸烯丙酯对磺酸盐 L-Isoleucine allyl ester p-sulfonate salt : 88224-05-9 质量规格: >98%,BR
卵黄琼脂培养基基础 进口分装 1-苄基D-谷酸 1-Benzyl D-Glutamate : 79338-14-0 质量规格: 0.98
乙酰胺琼脂 进口分装 N-乙酰-D-色酸 N-Acetyl-D-tryptophan : 138798 质量规格: 0.98
lateMedium(withoutAgar) 进口分装 DL-脯酸 DL-Proline : 609-36-9 质量规格: 0.99
阿尔玛蓝试剂盒蜡样芽孢杆菌冻干粉
盲肠肠球菌
产黄纤维单胞菌
膜醭毕赤酵母
巴西毛壳
焦曲霉PNPG4-硝基本基-β-D-半乳糖苷5克BR,1u/ul,小牛肠,液体
无水四硼醋内 wo7ium tqtrcborctq 1330-43-4
4-Trifluorometxyl-1-cyclohexen-1-ylboronic acid pinacol ester 683242-93-5
异绿原酸A Null,without related properties. 2450-53-5 20MG 标准品
K-卡拉胶/卡拉胶类型III/KAPPA-角叉菜/KAPPA-角叉菜聚糖/K-Carrageenan Karra Type BR 100克 国产/进口TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人细胞裂解液 (阳性对照)
猪肾细胞;PK(15)
神经小胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
CHOdhfr细胞,二缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 人癌细胞系,1590细胞 人星形胶质细胞裂解物HAL
猴肾细胞;vero IgRCD4-
IL12A Others Human 人 IL12A / NKSF1 人细胞裂解液 (阳性对照)
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。