样品DNA的制备
1.如果有N个样品, 设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性
对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀
释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积
一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数样品DNA提取试剂
盒兼容。也可以选购本公司的免提取核酸释放剂。
如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个
用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6
个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR
管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用
水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照
稀释液做模板)。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
3.在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设
置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好
后 加):
