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一、物质含量分析
基本原则:药品的含量或效价是评定药品的主要指标之一,其测定方法,应根据药品特性、剂型、处方、鉴别试验和纯度检查综合考虑,要保证测定方法具有一定的专属性,更加注重准确性、稳定性以及可重复性。
1、紫外可见光光度法
紫外可见光光度法是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法,该方法操作简单、准确度高、重现性好。常用的仪器为紫外可见光光度计,该仪器操作相对简单,成本较低,但由于仪器方法的原因,易产生干扰从而影响测量准确值。在制药实验室内常用于测量活性物质含量、类化合物的含量以及确认有害元素的限度等。
案例1:分光光度法测定中总黄酮的含量。
本案例是运用紫外可见光光度法测定中药材中有效物质的含量。需求设备:美析紫外可见光光度计UV-1900。
案例2:紫外可见光分光光度法测定水中的铁含量
本案例是运用紫外可见光光度法测定水中的金属元素含量。需求设备:美析紫外可见光光度计UV-1500。
2、高效液相色谱法
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。一般的为紫外可见光检测器,将各成分进行分离后,实现了单位时间内分析的专属性,从而保证了分析结果的准确性。此外检测器还包括二极管阵列检测器、荧光检测器、差示折光检测器、蒸发光检测器以及质谱检测器等,扩大了高效液相色谱法可分析物质的范围。
案例1:高效液相色谱法测定的含量。
本案例是运用高效液相色谱法测定西药中活性成分的典型案例。需求设备:岛津LC-20AT高效液相色谱仪;依利特P1201高效液相色谱仪。
案例2:高效液相色谱法同时测定中人参皂苷Rg1 、Re 、Rb1 与三七皂苷R1 含量。
本案例是运用高效液相色谱法同时测定中药中几种有效成分的成功案例。需求设备:岛津LC-2030高效液相色谱仪;依利特P230高效液相色谱仪。
案例3:高效液相色谱法-荧光检测器同时检测龙眼中多菌灵和噻菌灵残留
本案例是运用高效液相色谱法并加用荧光检测器测定农药残留的运用案例。需求设备:沃特世2695高效液相色谱仪+沃特世2596荧光检测器;依利特P230高效液相色谱仪+依利特LIFD230荧光检测器。
案例4:示差折光高效液相色谱法测定中的糖
本案例是运用高效液相色谱法并加用示差折光检测器测定紫外吸收不明显的物质含量。需求设备:安捷伦1260高效液相色谱仪+安捷伦1200示差折光检测器;依利特P230高效液相色谱仪+依利特RI230示差折光检测器。
案例5:高效液相色谱法-蒸发光散射检测器法测定红参及育精胶囊中人参皂苷Rg1 和Re 的含量
本案例中,是运用高效液相色谱法加蒸发光检测器检测有紫外吸收的物质含量,能够降低较低紫外吸收波长(203nm)造成的结果偏移。需求设备:安捷伦1260高效液相色谱仪+安捷伦1260蒸发光散射检测器;岛津LC-2030高效液相色谱仪+上海通微ELSP-UM-5000蒸发光检测器。
案例6:超高效液相色谱-质谱联用技术在中药指纹图谱中的应用
本案例中,详细综述了液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)在中药分离鉴别中的应用。需求设备:岛津LCMS8050;安捷伦6495。
3、气相色谱法
气相色谱法就是移动相为气体,根据所用固定相的不同可分为两类:固定相是固体的,称为气固色谱法;固定相是液体的则称为气液色谱法。均利用移动相在固定相中的被吸附强度差别或者分配能力不一,将成分分离,进而实现了分析的专属性。气相色谱法中可以使用的检测器有很多种,有火焰电离检测器(FID)与热导检测器(TCD),此外好包括质谱检测器等。
案例1:气相色谱技术在中药农药残留检测中的应用
本案例中,详细综述了气相色谱技术在中药中测量农药残留方面的应用。需求设备:岛津GC-2010 plus;仪盟A90;上海恒平GC-1120。
案例2:气相色谱法同时测定中麝香酮、龙脑、樟脑、异龙脑的含量
本案例中,运用气相色谱法测量产品中的挥发性成分。需求设备:安捷伦7890气相色谱仪;
案例3:气相色谱法/三重四极杆质谱测定番茄酱中72种农药残留量
本案例中,运用气象色谱-质谱联用技术,大通量的测量若干种农药残留量。需求设备:安捷伦7000系列三重四极杆气质联用仪
4、荧光分光光度法
荧光分光光度法是利用物质的荧光特性,来进行的定性或定量测量方法,荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
案例1:荧光光度法测定类抗生素含量
本案例阐述了荧光光度法在药物成分含量测定方面的应用。需求设备:天瑞仪器SUPER XRF 1050荧光光谱仪;
案例2:原子荧光光谱法测定中药材中汞的可行性研究
本案例阐述了原子荧光光谱法在微量元素含量分析方面的应用。需求设备:北分瑞利AF-630A原子荧光光谱仪;