Annexin V-AF647染色液用于鉴定凋亡和坏死细胞。
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记荧光染料AF647利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。
Annexin V搭配碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或7-AAD等DNA染色液使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。
本试剂搭配PI检测诱导的Jurkat细胞凋亡效果如下图所示：

实验操作指南步骤：

1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。
   注：本品仅在悬浮培养的细胞中验证，良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为消化等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。

2. 取1-5×10^5重悬的细胞，300g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。

3. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-AF647染色液和5μL的细胞核DNA染色液。

4. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15-20min。

5. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

保存条件：
4℃可保存1年；Annexin V-AF647染色液需要避光保存。

注意事项：

1. 为获得的使用效果，请在3-6个月内使用，Annexin V-AF647禁止冷冻保存；

2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加；

3. 荧光物质均易发生淬灭，进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，操作和存放过程尽量注意避光保存；
   

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 
   

(本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗)