品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代;5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928品牌冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928品牌细胞传代培养
一、原理 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分 瓶。
二、材料和试剂 1、细胞:贴壁细胞株 2、试剂:0.25%、1640培养基(含10%小牛血清) 3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等
三、操作步骤 1、将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。 2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底细胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移,原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时将弃去,加入10ml培养液终止消化。 观察消化也可以用肉眼,当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1—3分钟。 4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液,分到另外两到三瓶中,实践培养液塞好橡皮塞,置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。 附:消化液配制方法: 称取0.25克蛋白酶(活力为1:250),加入100ml无Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,滤器过滤除菌,4℃保存,用前可在37℃下回温。 溶液中也可加入EDTA,使zui终浓度达0.02%。
小鼠肉瘤瘤株;S180
牛胚气管细胞;EB (NBL-4)
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
A172细胞,胶质母细胞瘤细胞 肝细胞癌,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205
人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg
CDH12 Others Human 人 CDH12 人细胞裂解液 (阳性对照)
人十二脂肠腺癌;HuTu-80
人骨髓间充质干细胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105)
CM-R032大鼠肠静脉内皮细胞*培养基100mL
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1 小鼠肝动脉平滑肌细胞*培养基 100mL
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞 Mouse
FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人细胞裂解液 (阳性对照)
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8
CL-0209SHZ-88(大鼠癌细胞)5×106cells/瓶×2
3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 小鼠肝癌细胞,HEPA1-6细胞 FO(骨髓瘤细胞)
人肾透明细胞癌;Caki-1
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照)
StrainStoreMedium
Potato glucose agar 马铃薯葡萄糖琼脂 1.10130.0500 MERCK默克 incubation media Potato glucose agar 马铃薯葡萄糖琼脂 1.10130.0500 MERCK默克
改良CCD琼脂基础 250g 用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每100mL基础培养基需添加1支配套试剂
小鼠胚胎干细胞无血清培养基Mediumwithoutserumofmouseembryonicstemcells
BufferedPower-nitratemedium
EF-18 琼脂 EF-18 Agar 250 用于滤膜法检测食品中沙门氏菌(SN/T1059.1)
EEM培养基 EEM medium 250 用于致病性大肠杆菌的增菌培养和肠杆菌的增菌培养(Japan方法)
EC 肉汤 E.Coli Broth 250 用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(SN标准)
DTM培养基 DTM Medium 250 用于食品中真菌的培养(Merck方法)
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928品牌PlateCountAgar
培养基(改良高氏1号) 250g 用于的分离培养
D-环 0.1g/支*2 加入250ml TSC琼脂基础中
改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)基础250g/瓶用于O选择性增菌,每225ml培养基中添加incubationmedia改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)基础250g/瓶用于O选择性增菌,每225ml培养基中添加1601
RoseBengalMedium
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928品牌注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。