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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一无精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代;5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书细胞传代培养
一、原理 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分 瓶。
二、材料和试剂 1、细胞:贴壁细胞株 2、试剂:0.25%、1640培养基(含10%小牛血清) 3、仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等
三、操作步骤 1、将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。 2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底细胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移,原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时将弃去,加入10ml培养液终止消化。 观察消化也可以用肉眼,当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1—3分钟。 4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液,分到另外两到三瓶中,实践培养液塞好橡皮塞,置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。 附:消化液配制方法: 称取0.25克蛋白酶(活力为1:250),加入100ml无Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,滤器过滤除菌,4℃保存,用前可在37℃下回温。 溶液中也可加入EDTA,使zui终浓度达0.02%。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠胚胎成纤维细胞;PA317
CM-H102表皮角化细胞*培养基100mL
CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
HCT116, 人结直肠癌细胞 垂体瘤,AtT20细胞 COS-7(非洲青猴肾细胞)
人肺腺癌细胞;Calu-3
CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人无色素睫状上皮细胞 cDNAHNPCEpiC cDNA
REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人细胞裂解液 (阳性对照)
正常大鼠肾细胞;NRK
Panc 10.05细胞,人胰腺腺癌细胞 人舌鳞癌细胞系,TSCCA细胞 大鼠脑胶质瘤细胞;C6
JeKo-1(人套细胞淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝细胞维持培养液 500ml
CPM Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 人细胞裂解液 (阳性对照)
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6
BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞
293XL-hTLR7人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR7 DMEM+10% Hyclone 灭活血清+10 μg/ml Blasticidin
NOG Protein Human 重组人 Noggin / NOG 蛋白 (His 标签)
人前列腺平滑肌细胞(HPSMC)(5×105) 细胞名称 种属
BacillusMegatheriumMedium
Plate Count Agar incubation media Plate Count Agar
短短芽孢杆菌 支/瓶
ChinaBlueAgar
WortBroth
60%/L蛋白胨肉汤 60%/L NaCl Peptone Water 250 用于副溶血性弧菌的前增菌培养
4-甲基伞形-D-葡萄糖醛酸苷 (MUG) 0.1 0.01g添加于100ml LST-MUG中用于0157鉴定
42℃生长培养基 42℃growth Medium 250 用于副溶血性弧菌42℃生长试验
40%尿素水 40%Urea Water 5ml*10 加入尿素酶琼脂基础
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书MaconkeyAgarNo.2
Malt extract broty 麦芽琼脂 1.05397.0500 MERCK默克 incubation media Malt extract broty 麦芽琼脂 1.05397.0500 MERCK默克
卵黄琼脂培养基基础 250g 用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养和酶试验(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.68,GB/T4...
干细胞*培养基
品红亚钠琼脂 250g 用于饮用水,水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证(G