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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称:细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)
英文名称:Intracellular calcium fluorescence probe
产品规格:20微升
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0163831
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品介绍:
本品是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。用于细胞内钙离子检测时,Fluo-3 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM适当溶液和细胞一起在20-37℃孵育15-60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM在细胞内*转变成Fluo-3。本Fluo-3 AM (钙离子荧光探针) 是配制于无水DMSO中的储存液,浓度为5mM。 分子式:C51H50Cl2N2O23 分子量:1129.85 Fluo-3和Fura-2相比,其优点是:一方面可以被氩离子激光(argon-ion laser)的488nm激发光激发,便于检测;另一方面,Fluo-3和钙离子结合后荧光变化更,即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏;同时,Fluo-3和钙离子的结合能力较弱,这样可以比Fura-2检测到细胞内更高浓度的钙离子水平;此外,对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确,减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。 注意事项: 1. 本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。 2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 储存条件:-20℃,有效期6个月。 |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
体液葡萄糖氧化酶比色法定量检测试剂盒
食物葡萄糖氧化酶比色法定量检测试剂盒
果菜谷比色法定量检测试剂盒
乳品谷比色法定量检测试剂盒
食物谷比色法定量检测试剂盒
杨梅苷(标准品) Myricetrin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3elisa猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)elisa规格:96T/48T
杨芽黄素(标准品) Tectochrysin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠骨特性碱性0酸酶(BALP)elisa ,英文名: BALP ELISA Kit
洋川芎内酯A(标准品) Senkyunolide A 质量规格:鉴别用,标准品 大鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA检测试剂盒Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 96T/48T
氧化槐果碱(标准品) Oxysophocarpine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人胞质动力蛋白(CD)试剂盒 Human cytoplasmic dynein,CD ELISA kit
Belinostat Belinostat (PXD101) 质量规格:>98% RatVitaminC,VCELISAKit大鼠C(VC)elisa规格:96T/48T
氧化前胡素(标准品) Oxypeucedanin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 OXALATE(盐)血液抗凝液100毫升
野百合碱(标准品) Crotaline;Monocrotaline 质量规格:HPLC≥98%,标准品 PorcineIerferonα,IFN-αelisa猪α干扰素(IFN-α)elisa规格:96T/48T
(标准品) Scutellarin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠骨桥素(OPN)elisa ,英文名: OPN ELISA Kit
野黄芩素(标准品) Scutellarein 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA检测试剂盒ratai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit 96T/48T
8-O-乙酰山栀苷甲酯(标准品) 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester 质量规格:HPLC≥98%,标准品 人胞外氧化物歧化酶(SOD3)试剂盒 Human Exacellular superoxide dismase [Cu-Zn](SOD3)ELISA kit
细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)阿西替尼 Axitinib 质量规格:>99%,VEGFR 抑制剂,细胞培养级 冰冻切片组织组蛋白荧光显微镜检测试剂盒10/20
阿扎隆 Azaperone 质量规格:>99% 冰冻组织固着液50毫升
Azasetron HCl 质量规格:>98.5%,BR 病毒HRP标记制备试剂盒5(100微克/)
氮卓斯汀碱 Azelastine base 质量规格:>97% 病毒包装20样本
锌 Bacitracin Zinc 质量规格:≥60U/mg,USP,BR,可用于细胞培养 波形蛋白(Vimein)结合分子(bindingmolecules)检测试剂盒20
盐酸贝那普/苯那普 Benazepril 质量规格:>98%,BR 玻璃清洁剂(橱窗、大门、汽车玻璃等)500毫升/瓶
盐酸贝那普/苯那普 Benazepril 质量规格:含量测定 不溶性GST融合蛋白溶解试剂盒10
Bezafibrate 质量规格:>98% 部分蛋白酶切多肽谱分析试剂盒10
Bezafibrate 质量规格:HPLC>98%,标准品 草莓*培养基500毫升溶液/片剂
布南色林 Blonanserin 质量规格:>99% 层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒MonkeyLaminin,LNELISAKit 96T/48T
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。