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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称:细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)
英文名称:Fura-2 pentakis ester
产品规格:50微升
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0163832
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品介绍:
本品是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。 用于细胞内钙离子检测时,Fura-2 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的适当溶液和细胞一起在4-37℃孵育15-60分钟,即可完成荧光探针的装载。 本Fura-2 AM(钙离子荧光探针)是配制于无水DMSO(anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为2mM。 分子式:C44H47N3O24 分子量:1001.9 Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM的荧光比较弱,大激发波长为369nm,大发射波长为 478nm,并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2,从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合,结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后,大激发波长为335nm(大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同),大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm,发射波长为510nm。如果做双波长检测,则推荐使用的激发波长为340nm和380nm。Fura-2的激发光谱参考下图,不同曲线表示不同钙离子浓度时的激发光谱。 Fura-2相对而言有较的抗荧光淬灭能力,在荧光显微镜或其它荧光检测设备上可以连续检测1小时而不明显影响其荧光效果。 注意事项: 1. 本Fura-2 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。 2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 储存条件:-20℃,有效期6个月。 |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
体液脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量检测试剂盒
细菌脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量检测试剂盒
细胞脯肽酶(prolidase;PLD)克林纳(Chinard)比色法
组织脯肽酶(prolidase;PLD)克林纳(Chinard)比色法
血液脯肽酶(prolidase;PLD)克林纳(Chinard)比色法
Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)elisa 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 19952-47-7 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S
Human maix exacellular phosphoglycoprotein (MEPE) ELISA Kit 人细胞外基质0酸糖蛋白(MEPE)elisa 2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane 中文名:2,2-双(3-氨基-4-羟)六氟丙烷 分子式:C15H12F6N2O2
Human lung cancer marker ELISA Kit 人肺癌标志物elisa 2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol 中文名: 分子式:C11H14O5
Human lung cancer marker DR-70 (DR-70TM) ELISA Kit 人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)elisa 21-Deoxyneridienone B 924910-83-8 中文名: 分子式:C21H28O3
Human hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 人肝细胞生长因子(HGF)elisa 2,4-Dihydroxypyridine 626-03-9 中文名: 分子式:C5H5NO2
细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM) Lacidipine 质量规格:含量测定 ELISAKitTAFI人纤溶抑制因子规格:48T/96T
Lacidipine 质量规格:>99%,BR 小鼠肝脂酶(HL)elisa ,英文名: HL ELISA Kit
尼林 Nicergoline 质量规格:含量测定 大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA检测试剂盒Ratfreefattyacids,FFAELISAKit 96T/48T
Xylometazoline 质量规格:HPLC>98%,标准品 人白介素31(IL-31)试剂盒 Human IL-31 ELISA Kit
Xylometazoline 质量规格:>98%,BR 人神经营养因子3(-3)ELISAKit人神经营养因子3(-3)elisa规格:96T/48T
二氢钾 Potassium Dihydrogen Phosphate 质量规格:比色法含量测定 PAR-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
长春胺 Vincamine 质量规格:含量测定 PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPelisa猪骨钙素/骨谷蛋白(OT/BGP)elisa规格:96T/48T
盐酸咪达普 Imidapril 质量规格:HPLC法含量测定 小鼠型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)elisa ,英文名: L-FABP ELISA Kit
喹 Piperaquine phosphate 质量规格:含量测定 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA检测试剂盒RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T
西沙必 Cisapride Monohydrate 质量规格:含量测定 人白介素3(IL-3)试剂盒 Human Ierleukin 3 ELISA KIT
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。