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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称:高纯质粒小提试剂盒(1~5mL)
英文名称:PlasmidPure Mini Kit(1~5mL)
产品规格:200次
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0163409
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品介绍:
本试剂盒适合提取1~5mL菌液,在碱裂解法裂解细胞的基础上,采用*的硅基质膜吸附技术和试剂配方,通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA,每个吸附柱高可吸附30μg的质粒DNA,并大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。 储存条件:室温(15~30℃)。 自备试剂:无水乙醇。 实验前准备及重要注意事项: 所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,将吸附柱置于2~8℃可保存更长时间,加入RNase A的Buffer P1置于2~8℃可稳定保存6个月。 次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混匀,置于2~8℃保存,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。 次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。 使用前若发现Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。 注意不要直接接触Buffer P2、Buffer N3和Buffer PB,使用后应立即盖紧盖子。 提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。 操作步骤: 取1~5mL过夜培养的菌液加入离心管(自备)中,13000rpm(~16200×g)离心30秒收集菌体沉淀,尽量吸弃上清。 向留有菌体沉淀的离心管中加入250μL Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮菌体沉淀。 注意:如果菌块未*混匀,将会影响裂解效果,导致提取量和纯度偏低。 向离心管中加入250μL Buffer P2,温和地上下颠倒混匀4~6次,充分混匀使菌体裂解,此时溶液应变得清亮粘稠。 注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。 此步骤所用时间应不过5分钟,避免质粒受到破坏。 向离心管中加入350μL Buffer N3,立即温和地上下颠倒混匀8~10次,充分混匀,此时应出现白色絮状沉淀。13000rpm离心5分钟。 注意:Buffer N3加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。 将步骤4中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱DM中,13000rpm离心30秒钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。 向吸附柱中加入150μL Buffer PB,13000rpm离心30秒。 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。 将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位加入50~100μL Buffer EB,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。 注意: 1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟,将质粒溶液收集到离心管中。 2)质粒拷贝数较低或>10kb时,Buffer EB在65~70℃水浴预热,可以增加提取效率。 |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
真菌/酵母细胞亚硝酸盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒
藻类细胞亚硝酸盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒
植物铁型亚硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒
真菌/酵母细胞铁型亚硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒
藻类细胞铁型亚硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒
山羊生长激素释放多肽elisa 山羊生长激素释放多肽试剂盒 规格型号:96T/48T 山羊生长激素释放多肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa(进口分装),产品别名:山羊生长激素释放多肽试剂盒、山羊生长激素释放多肽elisa 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5
山羊生长激素释放多肽(GHRP)elisa 3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3
山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISAKit 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 4568-71-2 中文名:3-苄基-5-(2-)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS
山羊 英文名称: Coisol 规格: 48T/96T 英文缩写: CO 3-Ethoxya-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2
山羊内啡肽(EP)elisa 3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2
高纯质粒小提试剂盒(1~5mL)D-α-氨基己二酸 D-a-Aminoadipic acid 质量规格:0.97 英文名称RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠诱导型合成酶(iNOS)规格:96T/48T
D-高苯丙 D-Homophenylalanine 质量规格:>90%(T),BR 高效液相色谱(HPLC)分析20样本
D-焦谷 D-Pyroglutamic acid 质量规格:0.98 ELISAKitOSM人抑瘤素M规格:48T/96T
D-环丙基丙 D-Cyclopropylalanine 质量规格:BR 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)elisa ,英文名: M-CSF ELISA Kit
D-叔亮盐酸盐 D-tert-Leucine 质量规格:BR,98.5% 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA检测试剂盒RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T
D-正缬 D-Norvaline 质量规格:>98%,BR 人催产素(OT)试剂盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit
D-苯丙甲酯盐酸盐 H-D-Phe-OMe·HCl 质量规格:>99%,BR Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠醇结合蛋白(RBP)elisa规格:96T/48T
N-乙酰-D-谷 Ac-D-Glu-OH 质量规格:>98%,BR Hollande固着液50毫升
CBZ-D-亮 Z-D-Leu-OH 质量规格:BR,>98%,油状 MouseVitaminB6,VB6elisa小鼠B6(VB6)elisa规格:96T/48T
D-别异亮 D-allo-Isoleucine 质量规格:0.98 小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。