细菌内毒素标准品(10EU/支)
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细菌内毒素标准品(10EU/支)

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具体成交价以合同协议为准
2022-05-30 14:03:36
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BJ-F0163414
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产品简介

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详细介绍

生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
中文名称:细菌内毒素标准品(10EU/)
英文名称:Bacterial endotoxin standard
产品规格:10
发货周期:13
产品货号:BJ-F0163414
产品介绍:

本品常用用作细菌内毒素阳性对照,外观为白色疏松海绵状固体。

储存条件:常温运输,室温阴凉处保存,有效期一年。

内毒素标准溶液的配制:

1. 溶解:取一支标准品,加入细菌内毒素检查用水 1.0mL,复溶后置旋涡混匀器上混匀15分钟,得到溶解即为10EU/mL的内毒素标准品溶液。如果需要其他浓度的内毒素溶液,可根据实验要求配制。

2. 稀释:方法如下(0.10.250.51.0 EU/mL为例)

取上步配制的10EU/mL的内毒素溶液,稀释为1.0EU/mL的内毒素溶液,以1.0EU/mL的内毒素溶液为母液按下表稀释成0.1,0.25,0.5,1.0   EU/mL的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。

注意事项:

1. 本品为一次性使用。仅供体外鲎实验检测,禁止用于注射、口服等。

2. 实验所用的器皿需经过处理,以除去可能存在的外源性内毒素,可以经250℃干烤至少60分钟处理,也可以采用其他确保不干扰细菌内毒素检测的适宜方法处理。实验操作过程中应该防止微生物的污染。

3. 稀释的内毒素溶液静置时间过10分钟,用前需要在涡旋混匀器上剧烈混匀1分钟,放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。

使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70以下保存。无-70条件的,需在4冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20-40时不稳定,故长期保存最好在-70温度以下进行。

QQ截图20220307153709.png

注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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操作规程
1
、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升500010000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2
.加入适当浓度的010μL 受试化合物。
3
、将96孔板在37,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4
、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5
、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6
、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7
、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8
、结果分析
 a
、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD×100
 b
、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)T/C = 10%时的药物浓度(IC90)


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