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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称:凝胶法内毒素半定量试剂盒
英文名称:Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
产品规格:10×0.1mL
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0163415
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品介绍:
本试剂盒又称鲎试剂,为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。 储存条件:常温运输,阴凉处避光保存,有效期两年。 使用方法: 一、样品溶液的制备 样品的pH值应在6.0–8.0 之间,若出此范围,需用无热原缓冲液或0.1N氢氧化钠、0.1N 盐酸调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质,见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β-D-葡聚糖,需选用不会对(1,3)β-D-葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。 二:细菌内毒素标准溶液及对照液的准备 2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供) 取细菌内毒素工作标准品1支,按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ,1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。 注:鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。 2.2 阴性对照液:即无内毒素水。 2.3 阳性对照液:即浓度为2λ的内毒素标准溶液。 2.4样品阳性对照液:即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。 三:内毒素检测 3.1 鲎试剂的溶解:按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂*溶解。注意不要引起气泡,溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。 3.2样品溶液的制备 样品大有效稀释倍数(MVD)的计算: MVD= C?L/λ λ:测试用鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL);L:样品细菌内毒素限值;C:样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时,C的单位为1mL/mL;当L单位为EU/mg或者EU/U时,C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积,加无内毒素水制备样品溶液。 3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液,阳性对照液,样品,或样品阳性对照液。 封闭管口,轻轻摇匀,垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟,温育期间避免振动。 3.4 结果判断 3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出,缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶,不变形,不从管壁滑脱为阳性,记录为(+);不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性,记录为(-)。 3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性,阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性,实验方有效,否则无效。若阴性对照管为阳性,提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性,提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低,鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确,或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性,提示反应体系内有干扰因素存在。 |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性滤膜染色试剂盒
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性滤膜染色试剂盒(带滤膜)
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒
动物细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒
抑制剂 10g Polyphyllin D 50773-41-6 中文名:重楼皂苷D 分子式:C44H70O16 度:98.0% 关键词:
检测 Alkaline phosphatase (AKP) detection Polypodine B 中文名:水龙骨甾酮B 分子式:C27H44O8 度:97.5%
测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 Tetracaine 136-47-0 分子式:C15H25ClN2O2 度:98.0% 关键词:
测定试剂盒(紫外比色法) Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 153012-37-4 中文名: 分子式:C28H42N6O8S2
1:250 250g Polyphyllin D 中文名:重楼皂苷D 分子式:C44H70O16 度:98.0%
凝胶法内毒素半定量试剂盒蟛蜞菊内酯 HPLC≥98% 20mg 犬巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒 Canine Macrophage-Derived Chemokine,MDC/CCL22 ELISA Kit
霹雳萝芙木碱 HPLC≥98% 10mg 英文名称HumapPELISAKit人血栓前体蛋白(TpP)规格:96T/48T
平贝碱甲 HPLC≥98% 20mg 化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒20
苹果酸 HPLC≥98% 20mg RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1elisa大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)elisa规格:96T/48T
蒲公英赛醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)elisa ,英文名: REG-1a ELISA Kit
蒲公英甾醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA检测试剂盒MousecoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T
蒲公英甾醇乙酸酯 HPLC≥98% 10mg 人精脒/精胺N(1)-乙酰转移酶样蛋白1(SATL1)试剂盒 Human SATL1 ELISA Kit
HPLC≥98% 20mg RatAngiogenin,ANGELISAKit大鼠血管生长素(ANG)elisa规格:96T/48T
七叶苷XVII HPLC≥98% 20mg 载玻片细胞线粒体复合物IV蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
七叶树皂苷B HPLC≥98% 20mg mouseadrencocoicoopichormone,ACTHelisa小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)elisa规格:96T/48T
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。