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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称:内毒素清除试剂盒
英文名称:Endotoxin removing Kit
产品规格:1.5mL
发货周期:1~3天
产品货号:BJ-F0163416
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品介绍:
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂,它以修饰过的B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化,样品终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。 细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此,内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。 试剂盒特点: 1.高稳定性,高去除效率。 2.高结合力:> 2000,000 EU/mL。 3. pH范围为5-10时,亲和介质对内毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8时,清除效率高。 4. 无需恒流泵即可调节流速。 5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。 6. 使用方便,试剂盒中提供无热原缓冲液,无热原收集管及无热原枪头等。 7.适合纯化对象为蛋白,多肽,抗体,多糖等。 8.可耐受试剂:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐温-20,10mM DTT等。 储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。 使用方法: 1.样品处理:样品的pH值和离子度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9,但是7-8的pH范围是纯化的佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附,0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以,纯化之前可以使用处理过的氯化钠,0.1 M的氢氧化钠或0.1 M盐酸来调节离子度或pH值。 2.活化亲和介质:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除预装柱顶部的盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5mL的(预冷)再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生缓冲液流干,再加入5mL 再生缓冲液,再重复操作两次,确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。 3. 平衡亲和介质:活化完毕后,加入6mL的(预冷)平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。 4.内毒素清除:将流速控制器关闭,使用无热原枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液体积达到1.5mL后,使用无热原接收管接受样品,样品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。 5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱重新再生,按照步骤1 重新再生,然后上样纯化。 6. 储存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02% |
使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的,需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
真菌/酵母醛酮还原酶(aldo-keto reductase)总活性比色法定量检测试剂盒
植物醛酮还原酶(aldo-keto reductase)总活性比色法定量检测试剂盒
动物细胞醛酮还原酶1A(aldo-keto reductase 1A)活性比色法定量检测试剂盒
动物细胞醛酮还原酶1B(aldo-keto reductase 1B)活性比色法定量检测试剂盒
动物细胞醛酮还原酶1C(aldo-keto reductase 1C)活性比色法定量检测试剂盒
FDA水解酶试剂盒 可见分光光度法 50管/24样 4-Amino-3,5-dichloropyridine 22889-78-7 中文名: 分子式:C5H4Cl2N2
E选择素 英文名称: Human E selectin 规格: 48T/96T 英文缩写: ES 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S
Ethyleneglycol Oleandrin 465-16-7 中文名: 分子式:C32H48O9
EthidiumBromide(EB) 1ml(10mg/ml) Oleandrin 中文名: 分子式:C32H48O9
EosinY,Salt 10x25g Prednisone 21-acetate 125-10-0 中文名:醋酸 分子式:C23H28O6
内毒素清除试剂盒 Propafenone 质量规格:>98%,BR 大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA检测试剂盒Ratai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 96T/48T
呫吨酸 Xanthene-9-carboxylic acid 质量规格:供检查用 人白介素29(IL-29)试剂盒 Human Ierleukin 29,IL-29 ELISA Kit
呫吨酮 Xanthone 质量规格:供HPLC法有关物质检查用 英文名称MouseTissuefactorELISAKit小鼠组织因子(TF)规格:96T/48T
Methyl eugenol 质量规格:含量测定 pBaBe-PURO+MiRNAMiRNA表达
香叶醇 Geraniol 质量规格:含量测定 Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFelisa猪血小板衍生生长因子(PDGF)elisa规格:96T/48T
Benzaldehyde 质量规格:含量测定 小鼠甘露糖结合蛋白(MBL)elisa ,英文名: MBL ELISA Kit
卡维丁 Cavidine 质量规格:含量测定 人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA检测试剂盒HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 96T/48T
5-羟色胺盐酸盐 Serotonin 质量规格:含量测定 大鼠色羟化酶(TPH)试剂盒 Rat yptophan Hydroxylase,TPH ELISA Kit
Evening primrose oil 质量规格:鉴别 英文名称RatF1+2ELISAKit大鼠原片段F1+2规格:96T/48T
龙血素A Loureirin A 质量规格:含量测定 活体细胞组织蛋白酶K(CATHEPSINK)活性原位荧光染色检测试剂盒20
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。