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中文名称：无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5～5mL)
英文名称：Endotoxin-free Plasmid Mini Kit(1.5-5mL)
产品规格：50次
发货周期：1～3天
产品货号：BJ-F0163393
产品介绍：
本试剂盒采用菌体内毒素清除剂，在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉，*避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物，再从中纯化质粒DNA的弊端。用本试剂盒提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。 试剂盒特点： 操作简单，只在经典的柱式质粒DNA提取前，增加菌体内毒素清除一步。 去内毒素效果好，处理一次可以去除99%以上的内毒素。 质粒丢失少，产率只比柱式质粒低5～10%，效果好于先提质粒DNA，再用液相内毒素清除剂处理的方法。 DNA可以直接用于转染等实验。 储存条件： 常温运输及保存，有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低温运输和保存。 使用方法： 一、用菌体内毒素清除剂清除E.coli细胞壁上的内毒素。 收集1.5～5mL E.coli饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。 加入1mL菌体内毒素清除剂温和混匀后10000～12000rpm离心1分钟，弃上清（含内毒素）。 一次洗涤（1～2步）可以去掉90%以上的内毒素，如果需要，可以再重复上述洗涤操作步骤3次，得到的菌体可以直接进入后续的质粒DNA提取步骤。 二、从无内毒素的E.coli中提取质粒DNA 先将全部RNase A溶液全部加入到柱式质粒溶液A中，摇匀后再取用，未用完的柱式质粒溶液A好在4℃保存。 在第3步所得菌液中加入250μL柱式质粒溶液A，用枪头充分吹打使菌体重悬（此步在冰上操作效果更佳）。 注意：细胞未充分悬浮会影响后续操作，可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip吸头吹打沉淀至*混匀。 加入250μL柱式质粒溶液B（如果溶液B有沉淀，用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用），温和反复颠倒混匀4～6次，看到溶液变粘即可，然后冰上放置不过4～5分钟。 注意：此步处理不能过5分钟，否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡，否则基因组DNA断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放，否则空气中的二氧化碳会进入溶液，形成碳酸，中和溶液B中的NaOH，降低其效率）。 加入350μL冰上预冷的柱式质粒溶液C，反复颠倒混匀4～6次，可见白色沉淀物产生，然后冰上放置至少5分钟。 高转速（12000rpm以上）4℃离心5分钟，小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大，有时候出现沉淀漂浮是正常现象，取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行，更容易出现沉淀物漂浮的现象。 静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合，此步十分重要。 室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中的废液。 加入500μL的通用洗柱液，室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中废液。 注意：通用洗柱液中含乙醇，用后需要将盖拧紧存放，否则乙醇会挥发。 重复上步1次。 室温12000rpm离心1分钟，甩干残留液体。此步不能省略，否则残留乙醇会影响DNA的后续使用（如DNA上样时不能沉淀到加样孔中）。 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管（自备）中，加入30～100μL 65～80℃预热的DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液2.0也可以用于洗脱，但产量稍微有所降低。 室温12000rpm离心1分钟，离心管底溶液即质粒DNA。 注：由于的吸附柱结合DNA能力较，如果再加适量DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中，往往还能洗脱下很多质粒DNA（相当于次洗脱的20～30%），但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。 |
使用方法：本产品仅用于科研
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由专人(2人)运送，不得邮寄，最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。 8、结果分析
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
植物高质纯化线粒体分离试剂盒
真菌/酵母细胞线粒体粗提分离试剂盒
真菌/酵母细胞活性线粒体分离试剂盒
真菌/酵母细胞高质纯化线粒体分离试剂盒
纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒
植物类黄测试盒 可见分光光度法 50管/24样 Tropisetron 分子式：C17H21ClN2O2 度：98.0%
植物可溶性糖含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样 Pemetrexed di 中文名：二钠 分子式：C21H23N5Na2O6
植物激素脱落酸elisa 植物激素脱落酸试剂盒 规格型号：96T/48T 植物激素脱落酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa（进口分装），产品别名：植物激素脱落酸试剂盒、植物激素脱落酸eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Testosterone 中文名： 分子式：C19H28O2
植物激素脱落酸(ABA)elisa Tropicamide 1508-75-4 分子式：C17H20N2O2 度：98.0% 关键词：
植物激素脱落酸（ABA）ELISAKit Troxerutin 中文名： 分子式：C33H42O19 度：98.0%
无内毒素质粒DNA小提试剂盒(1.5～5mL)吉马酮 HPLC≥98% 20mg 犬热休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)试剂盒 Dog heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit
吉妥辛 HPLC≥98% 20mg 英文名称humanf-E3ELISAKIT人游离雌三醇(f-E3)规格：96T/48T
HPLC≥98% 100mg 初级离心柱DNA回收试剂盒20
加兰他敏 HPLC≥98% 20mg Rathemeoxygenase2,HO-2elisa大鼠血红素氧合酶2(HO-2)elisa规格：96T/48T
HPLC≥98% 20mg 小鼠中间α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)elisa ，英文名： ITIH5 ELISA Kit
查尔酮 HPLC≥98% 5mg 犬白介素18(IL-18)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin18,IL-18ELISAKIT 96T/48T
甲基当药宁 HPLC≥98% 10mg 犬热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒 Canine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
HPLC≥98% 20mg 英文名称humanf-β-HCGELISAKIT人游离β绒毛膜(f-β-HCG)规格：96T/48T
甲基黄连碱 HPLC≥98% 20mg 创伤弧菌(Vibriovulnificus)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
甲基莲心碱 HPLC≥98% 20mg Rathepaticlipase,HLelisa大鼠肝脂酶(HL)elisa规格：96T/48T
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。
