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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。 8、结果分析
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称：革兰氏阳性菌质粒提取试剂盒(1～4mL)
英文名称：Gram+ Bacteria Plasmid extraction kit(1-4mL)
产品规格：50次
发货周期：1～3天
产品货号：BJ-F0163394
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。
产品介绍：
本试剂盒用于从革氏阳性细菌小量制备质粒DNA。本产品基于改良后的碱变性法，先菌体经破壁，然后碱裂解法处理使基因组DNA和质粒DNA均变性，再用酸中和，质粒DNA客户快速复性，而基因组DNA不能快速复性，故可以通过离心去除，除去后含质粒的上清用离心吸附柱吸附质粒DNA，洗去杂质，即可得到纯化的质粒DNA。 试剂盒特点： 快速、步骤少，整个操作在40分钟左右完成。 不需要预平衡离心吸附柱。 通用洗柱液即开即用，不需要用户额外加乙醇。 溶液B中有蓝色染料，便于目测非常关键的碱变性和中和反应两步的溶液混匀状况，保证实验效果。 产量高，一次可以处理1～4mL过夜培养的G+菌液，每毫升过夜培养的G+细菌可以提取到2～5μg/mL（取决于质粒是高拷贝、中拷贝还是低拷贝）。 纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8～2.0之间，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。 保存条件： 常温运输和保存，RNase A溶液需要-20℃保存，有效期一年。 使用方法： 从筛选平板上挑取单菌落至含抗生素的培养基中，37℃震荡培养12～16小时（摇床转速200-300）。注意：建议使用LB培养基，营养更丰富的培养基会使菌体浓度过高，过纯化系统处理能力而降低DNA质量。另外，延长培养时间会因细胞死亡、裂解而造成质粒DNA浓度降低。 用1.5mL离心管收集1～4mL过夜培养饱和菌液，室温12000rpm离心1分钟，弃上清，再短暂离心，吸弃残留液体。 次使用本试剂盒时，先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A放4℃保存。 加入250μL溶液A，用枪头充分吹打使菌体重悬。注意：细胞未充分悬浮会影响后续碱变性，可以使用漩涡振荡器混匀或使用枪头吸头吹打沉淀至*混匀。 加入大约5mg干粉（用0.1mg精度的分析天平称量），轻柔颠倒混匀后室温放置10分钟破裂细胞壁。 加入250μL溶液B（如果溶液B在低温放置产生沉淀，须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用），温和反复颠倒混匀看到溶液的蓝色变得均匀并且溶液变粘即可（一般需要颠倒4～6次），然后冰上放置不过5分钟。注意：冰上放置不要过5分钟，否则质粒DNA会有碱损伤。千万不要剧烈振荡，否则基因组DNA断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放，否则空气中的二氧化碳会进入溶液，形成碳酸，中和溶液B中的碱，降低其效率。如果溶液B颜色不是蓝色，则表示变质，应该弃之不用并且速跟联系。 加入350μL冰上预冷的溶液C，温和反复颠倒直到溶液颜色变成无色（一般需要颠倒混匀4～6次）。混匀后可见白色沉淀物产生，然后冰上放置至少5分钟让质粒DNA复性。 12000rpm离心3分钟，小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大，部分沉淀物悬浮在上清液中属正常，吸取上清时避开漂浮的沉淀物即可。如果此步的离心在4℃进行，可减轻沉淀物漂浮。 静置2分钟以让质粒DNA与离心吸附柱充分结合，保证静置不少于2分钟十分重要。 室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中的废液。 加入500μL的通用洗柱液到离心吸附柱中，室温12000rpm离心1分钟，弃收集管中废液。注意：通用洗柱液中含乙醇，每次用后需要将盖拧紧存放，否则乙醇会挥发。 重复上步1次。 室温12000rpm离心1分钟，甩干残留液体。此步不能省略，否则残留乙醇会影响DNA的后续使用（如残留乙醇使DNA溶液在电泳上样时不能沉淀到加样孔中）。 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管（自备）中，加入30～100μL65～80℃预热的DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液2.0也可以用于洗脱，但产量稍微有所降低。 室温12000rpm离心1分钟，离心管底溶液即质粒DNA。 由于的吸附柱结合DNA能力较，如果再加适量DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中，往往还能洗脱下很多质粒DNA（相当于次洗脱的20～30%），但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。 |
使用方法：本产品仅用于科研
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由专人(2人)运送，不得邮寄，最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
植物丙二醛（MDA）比色法定量检测试剂盒
丙二醛（MDA）终点比色法定量检测试剂盒
总抗氧化能力（TAC）终点比色法定量检测试剂盒
氧阴离子自由基终点比色法定量检测试剂盒
细胞一氧化氮（NO）活性比色法定量检测试剂盒
兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 2,2-Diphenylglycine 中文名： 分子式：C14H13NO2 度：98.0%
兔组织因子elisa 兔组织因子试剂盒 规格型号：96T/48T 兔组织因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa（进口分装），产品别名：兔组织因子试剂盒、兔组织因子eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Allopurinol 315-30-0 中文名： 分子式：C5H4N4O 度：98.0% 关键词：
兔组织因子 英文名称： Rabbit Tissue Factor 规格： 48T/96T 英文缩写： TF Allitol 488-44-8 中文名：蒜糖醇 分子式：C6H14O6 度：% 关键词： 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
兔组织金属蛋白酶抑制因子1 英文名称： Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1 规格： 48T/96T 英文缩写： TIMP-1 Allitol 488-44-8 中文名：蒜糖醇 分子式：C6H14O6
兔子组织因子(TF)elisa Allyl cinnamate 1866-31-5 中文名：肉桂酸烯丙酯 分子式：C12H12O2
革兰氏阳性菌质粒提取试剂盒(1～4mL)邻羟基苯乙酮(>99%,BR) 2-Hydroxyacetophenone 质量规格：>99%,BR 英文名称HumanCCL26ELISAKit人CCL26规格：96T/48T
2-异丙基咪唑(>98%,BR) 2-Isopropylimidazole 质量规格：>98%,BR 发酵液三醇比色法定量检测试剂盒20
2-萘乙酸(植物激素级) 2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid 质量规格：>98%,植物激素级 ELISAKitLTBP2人组织内转化生长因子β结合蛋白2规格：48T/96T
2-萘甲醛(>98%,BR) 2-Naphthaldehyde 质量规格：>98%,BR 小鼠黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)elisa ，英文名： MAdCAM1 ELISA Kit
乙酸-2-萘酯(>98%,BR) 2-Naphthyl acetate 质量规格：>98%,BR 人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA检测试剂盒Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 96T/48T
3,4,5-三甲氧基肉桂酸(>98%,BR) 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid 质量规格：>98%,BR 大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)试剂盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit
藜芦醛(>99%,BR) 3,4-Dimethoxybenzaldehyde 质量规格：>99%,BR 英文名称HumanCCL24ELISAKit人CCL24规格：96T/48T
3-羟基(>98%,BR) 3-Hydroxybenzaldehyde 质量规格：>98%,BR 非哺乳动物封阻缓冲液100毫升
间羟基肉桂酸(>98%,BR) 3-Hydroxycinnamic acid 质量规格：>98%,BR ELISAKitTPA人组织多肽抗原规格：48T/96T
4,4-二羟基二苯砜(>98%,BR) 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone 质量规格：>98%,BR 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)elisa ，英文名： NOX4 ELISA Kit
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
